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SDS-PAGE上样量多少合适? 分子量20KDa左右 ,应该用多大浓度的分离胶?15%我试过了,总是跑不开
如题所述
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推荐答案 2012-04-20
15%的胶应该是没问题的,跑的时间长一些,距离长一些就能跑开。上样量得看你蛋白的表达量,一般15-30μg就应该没有问题,不过选用β-actin做对照,建议用另一块12%的胶跑β-actin,这样可以使目的蛋白和对照条带宽度大概一致。
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其他回答
第1个回答 2012-04-20
可以试一下小分子胶,不过也15%没有问题。上样量影响不大,看你的样品浓度上样
第2个回答 2019-07-20
请问你的跑不开是怎样的,我之前做过一次是marker和样品都只在分离胶的上半部分分开,下半部分完全没有分开,都看不到marker的条带
第3个回答 2012-04-20
跑不开?考染? 如果是抗体杂的话不存在跑不开的问题吧 跑的久点。。。 或者用大胶跑 如果你们那有人会弄的话
相似回答
蛋白质
分子量
为
20
多的跑
sds-page分离胶
的电压大约是
多少
答:
也可以用,就是浓度略低了点,推荐分离胶的浓度一般是按照要分离的蛋白的分子量范围决定的,
10-80kDa的建议14% 20-150kDa的建议12% 30-200kDa的建议10%
根据这样的推荐来看,30是分离下限了,所以这个分离胶的浓度略低,可以试试12%或者15%的.
western blot中
分离胶浓度的
选择?
答:
western blot中分离胶
浓度的
选择取决于目的蛋白
分子量
不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如
15%的分离胶
更适合45
kDa
的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为western blot的膜应该是完全覆盖
SDS
PAGE
的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下 所以weste...
wb
胶的浓度
答:
根据目的蛋白的分子量大小选择不同浓度的分离胶,8%、12%和15%三种浓度的分离胶就完全可以搞定日常蛋白的测定。一般测定100kDa分子量以上的蛋白可选择8%浓度的分离胶;测定
20kDa分子量
以下的蛋白可选择
15%浓度的分离胶,
中间的分子量可选用12%浓度的分离胶。有的时候蛋白跑不出来,其实未必是分离胶浓度...
western blot中
的分离胶
的
浓度
怎么选择?
答:
不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,
比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白
。而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下。所以western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。...
蛋白质
SDS-PAGE
电泳
分离胶
和浓缩
胶的浓度
如何确定
?上样
缓冲液的倍数如何...
答:
1,看目的蛋白的大小 一般actin以下的可以跑12胶 红线左右可以用12或10跑 几百的很大的用6的胶 小蛋白12的10的一般都能跑 如果不考虑效率的话...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看 2,看样品
浓度多少,
以及你想用几次 通常我们是定到4微每微,总量100微,用10次 如果浓度小的话定到2用5次 ...
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Wb怎么确定上样量和上样浓度
wb的上样量
WB计算上样量40
上样量什么意思
蛋白上样量
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