核酸分子原位杂交中杂交液的基本成分

其中的单价阳离子、甲酰胺、葡聚糖硫酸酯各有什么作用?

核酸分子原位杂交中杂交液的基本成分:50%甲酰胺,ssDNA 100 μg/ml,探针20 ng,50 mmol/L DTT,5×Denhardt液,5%硫酸葡聚糖,4×SSC。
阳离子可以极大提高核酸互补链的杂交效率;
甲酰胺分子克隆第三版p510有详细的论述,用甲酰胺进行的杂交比通过调节温度更容易控制杂交的严谨性。
提高核酸杂交率 - 溶液中含10%的硫酸葡聚糖,DNA链的再退火率约增加10倍,这一现象进一步扩大了单链或双链的探针与固定在膜上的DNA/RNA的杂交率。不仅如此,添加10%硫酸葡聚糖也许会增加随机切割的双链DNA探针与固定化核酸的杂交率,高达100倍。
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