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Western Blot为什么必须要用内参
如题所述
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推荐答案 2015-03-24
预先必须测定蛋白浓度,然后计算出来某个上样量(如100微升)所需的体积,保证每一个样上样的蛋白的质量相同,再去跑胶,根据内参结果调节上样量。
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Western
Blot内参
抗体,实验成功一半!
答:
Western Blot是蛋白表达研究的常用手段,但操作过程中的误差可能影响结果。通过内参,
可以校正总蛋白浓度和上样过程中的偏差,确保定量分析的可靠性
。选择内参时,要考虑样本的物种来源、目的蛋白的分子量以及表达部位。例如,哺乳动物细胞通常选择β-actin,植物样本则选plant actin,而核蛋白检测则需核内参如...
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
Western
Blot用内参
校可以正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
内参是最容易被忽略的一项
。我们知道,要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础。特别表达量不高时,上样量的差别就很可能影响结果的分析。所以你需要内参。内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般...
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
内参检验系统是不是有问题,
因为内参多是选择管家基因编码的蛋白质,在生物体内是高表达的,同样同种样本的所含的百分比基本一样
,使用内参就可以确保在对样本的处理操作时规范的,同时,样本所含百分比相对稳定,也可以为wb系统提供一个相对定量的标准 ...
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
其实内参不是必定需要的。如果只要检测是否表达就不
需要内参
只要阳性对照。相反,如果需要定量的话就
必须要用内参
,主要是两大作用,1:因为内参一般都是表达量比较恒定的管家基因,所以可以将目的与内参的灰度值作比给目的定量,2:通过内参条带的形状看提取的蛋白质是否有降解 ...
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