血清中提取DNA的方法

要做PCR了,人的血样本,想从血清里提取DNA然后做PCR。
请问现在最常用,效果最好的方法有什么,试剂盒的话,哪家公司的性价比较高?

.DNA提取的几种方法
(1).浓盐法
利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.
也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.
两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.
以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.

(2).阴离子去污剂法:
用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA.
(3).苯酚抽提法:
苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 .

( 4).水抽提法:
利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% �1�680%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
第1个回答  2019-05-10
血清中提取dna可看看BIOG的操作步骤:1.请自行准备:无水乙醇、15mL离心管。2.取出洗涤液,按以下操作:a) 洗涤液A:31.5mL加入13.5mL无水乙醇;63mL加入27mL无水乙醇。b) 洗涤液B:13.5mL加入31.5mL无水乙醇;27mL加入63mL无水乙醇。c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。3.取15mL离心管,加入1500μL样本,30μLDNA Carrier混合均匀,加入1500μL 裂解液及150μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴10 分钟。4.加入6000μL无水乙醇,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA的提取与后续实验。5.将吸附柱放入收集管内,将4590μL上述溶液转入吸附柱内,静置2 分钟,5,000 rpm 离心2分钟,弃收集管内废液;6.将吸附柱放回收集管内,将剩余4590μL溶液转移至吸附柱内,重复步骤5。7.将吸附柱放回收集管内,加3750μL 洗涤液A至吸附柱内,5,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。8.将吸附柱放回收集管内,加3750μL 洗涤液B至吸附柱内,5,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。9.将吸附柱放回收集管内,5,000 rpm 离心2 分钟,离去残留的洗涤液。10.取出吸附柱,放入新的15 mL离心管内,加入250-400μL 洗脱液,静置3 分钟,5,000 rpm离心3 分钟,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。如需浓缩核酸,则可继续进行后续步骤。11.于洗脱液中加入800ul无水乙醇,轻轻颠倒混匀,5,000 rpm 离心5分钟,弃上清。12.开盖室温放置5min,待乙醇挥发后,加入30-50ul洗脱液溶解核酸。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
第2个回答  2013-07-23
武汉就这几家公司
给公司打电话他们把什么什么资料给你查好
然后你选择定就行了
比如凌飞、生命公司、众一生物、古态生物等本回答被网友采纳
第3个回答  2013-07-23
冷冻法!将血液承佃
第4个回答  2013-07-23
吖~~~你专业你都不知道,真悲哀。你DNA是不用提取了,提取出来也是做反面教材的~`~~~
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