55问答网
所有问题
在测序前如何进行pcr产物的酶切纯化,注意我想知道的是用于测序的pcr产物酶切纯化,不是用于克隆的酶
如题所述
举报该问题
其他回答
第1个回答 2013-07-23
我不太清楚你要做什么,能否再说的详细些?PCR产物纯化可以跑琼脂糖电泳,然后胶回收就行了。“酶切纯化”是用酶纯化?我觉得无论操作还是成本上都比不上agarose吧。PCR产物纯化试剂盒也有卖,这就更方便了,当然也贵些。另外直接把PCR产物送去测序也可以,现在很多公司都可以做到,无需你自己纯化。
相似回答
如何
对
PCR
扩增的
产物进行酶切
?
答:
1. 首先确认PCR产物,取一小部分PCR产物跑胶。2. 如果产物良好,一个特异性很强的条带,则用过柱的方法提纯
(就是你平时用的从溶液中纯化DNA的试剂盒就可以)。楼上说的跑胶后再提,早就过时了。效率很低。3,提纯加入限制性内切酶缓冲液,酶。按照平时的方法反应就可以了。4. 酶切后再过柱提...
如何
对
PCR
扩增的
产物进行酶切
?
答:
Fermentas公司的研究表明,限制性内切酶在 PCR扩增体系中仍然有部分活性,可以通过稀释(3倍以上)扩增混合液,适当提高酶量和反映时间
,进行酶切
。个人认为需要对
PCR产物进行酶切
分析通常是为了或基因表 型分析,由于Taq,Pfu等高温聚合
酶在酶切
温度(37度或更高)下,仍然保持一定的活性,高温聚合酶所...
用于
与载体连接
的pcr酶切产物是如何纯化
的 、、
答:
跑胶后找到目的片段,切胶回收
,纯化
的传统法就是将PCR产物加入2倍体积的乙醇-20度沉淀过夜后低速短暂离心(如 3000rpm离心1~2min),弃掉上清,然后用70%乙醇洗涤一次后,弃掉乙醇,放干后再用无菌水或者TE溶解.当然这种方法对
PCR产物纯化
后回收率是很低的,你需要多做几管
PCR,
然后一起纯化回收.但是现在...
PCR产物
用什么方法
纯化
答:
如果特异性扩增比较多,那么就割胶纯化。如果没有特异性扩增,只是除去杂质,那么
PCR产物纯化
试剂盒纯化一下。
pcr产物酶切
答:
体积与质量换算肯定是需要测浓度的。你需要准确计算的话就像楼上说的一样,用紫外分光光度计测DNA浓度。其实酶切的浓度不用算得那么精确,DNA加多了可以多反应一会嘛。你可以通过
PCR产物的
电泳条带亮度估算一下大致的浓度(与已知浓度的Marker比较),由此算出的DNA浓度用来酶切是没有问题的。
大家正在搜
酶切及pcr产物的电泳检测
Pcr的产物可以再次用来pcr吗
PCR产物为什么进行酶切
PCR产物直接酶切然后纯化
pcr产物酶切分析
质粒酶切产物pcr
pcr产物双酶切检验
pcr产物酶切后怎么回收
pcr的产物是双链吗
相关问题
在测序前如何进行pcr产物的酶切纯化,注意我想知道的是用于测...
对PCR扩增的产物进行酶切的方法?
对了我想问你一下,你之前说的在送去测序之前进行酶切检测,我想...
如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯...
PCR产物酶切使用之前的液体产物还是用经过跑琼脂糖凝胶后的凝...
pcr纯化试剂盒可以纯化掉酶吗
做好的PCR不用割胶直接给测序公司就可以,他们会跑胶的,条带...
PCR产物纯化后,连接载体PGMT,转化如DH5α后为何不能...