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简述单克隆抗体的制备过程。
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推荐答案 2023-04-16
【答案】:经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌单一抗原表位的特异性抗体,是单克隆抗体。单抗的制作过程大体分为抗原的制备,动物的免疫,b细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,筛选杂交瘤细胞,筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞,杂交瘤细胞的克隆化,体外大规模培养或动物腹腔培养特异性杂交瘤细胞克隆,单抗的纯化及鉴定。
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单克隆抗体的制备过程
答:
单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法
。(1)体内诱生法 取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。
简述单克隆抗体的制备过程
及原理。
答:
过程
:将上述骨髓瘤细胞与免疫的B细胞融合后,用含HAT(黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T))的选择培养基进行培养,未融合的脾细胞因不能在体外无限增值而死亡,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏此黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用此黄嘌呤而死亡。融合成功的杂交瘤细胞经筛选和
克隆
化建...
单克隆抗体的制备步骤
答:
单克隆抗体的
大量
制备
一般采用动物体内诱生法和体外培养法。
单克隆抗体的制备步骤
答:
3、选择性培养:选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞
,一般采用HAT选择性培养基。4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化:在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备:...
简述单克隆抗体的制备过程
答:
5.对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足量的能分泌所需
抗体的
细胞;6.最后,将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的
单克隆抗体
了!
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