反相色谱柱有什么特点?

如题所述

一、固定相不同

正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;反相色谱柱填料极性弱,洗脱顺序由强到弱。

非极性色谱柱:常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。

极性色谱柱:通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。

二、组成结构不同

非极性色谱柱:100%甲基聚硅氧烷;5%苯基甲基聚硅氧烷,1%乙烯基和5%苯基甲基聚硅氧烷;7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷。

极性色谱柱:聚乙二醇—TPA改性;聚乙二醇—20M。

三、应用不同

非极性色谱柱:碳氢化合物;氨基酸、基油;多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇;药物、醇、酯、硝基化合物。

极性色谱柱:酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油;六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药。

扩展资料:

影响色谱柱性能因素有:

一、物理因素:

1、硅胶纯度:硅胶纯度和残留金属离子浓度,硅胶的杂质会影响化合物的峰形,硅胶表面的金属含量高会影响碱性化合物的峰形,易发生拖尾。

2、色谱柱尺寸填料床的长度和内径,增加色谱柱长度,可以在一定程度上提高柱效,但也会升高压力和导致峰展宽;宽柱径,提高载样量,但也会增加横向扩散,同样会导致峰展宽。窄柱径可以节约溶剂,可减少横向扩散,但压力较大,对系统要求较高。

3、 颗粒形状及粒径球形颗粒柱效高、重现性好、柱床结构均匀,不规则形柱床结构不均匀、流动相线速度不均匀,容易谱带展宽;平均颗粒直径,粒径越小,柱效越高,柱压也越高。粒径分布越广则柱效越低,压力越大。

4、 颗粒表面积:颗粒外表面和内部孔表面的总和,以m2/g表示,相对而言高表面积对样品具有较强的保留能力,更大的柱容量和分离度。而低表面积能更快达到平衡状态,更适合梯度洗脱程序。

5、 孔径:颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围是80~300?,大孔径的填料颗粒可以延长大分子溶质在填料表面的滞留时间,改善分离,所以大孔径填料适合分离大分子化合物或者水动力体积较大的分子。

二、化学因素:

1、键合类型及键合相:键合相分子与基体单点相连为单体键合,这种键合方式可以提高传质速率,缩短柱平衡时间,;聚合体键合为键合相分子与基体多点相连,这种键合方式可以增加色谱柱稳定性,增加载样量。而键合相不同会直接影响化合物的保留行为。

2、碳覆盖率:高碳覆盖率可以提高分辨率和重现性,但分析时间长。

3、封端:硅胶键合相填料中有部分未封端的残留硅羟基,如图封端可以减轻待测组分与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应,改善保留和峰行,这对于碱性化合物尤其重要。而不同的封端技术也会直接影响色谱柱的效能。

参考资料来源:百度百科——色谱柱

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