实验一 蛙坐骨神经腓肠肌标本制备
[目的] 熟悉蛙 (或蟾蜍) 的坐骨神经腓肠肌标本的制备方法,初步掌握几项基本实验操作。
[原理] 蛙类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相类似,而其组织在离体状态下,易于控制和掌握,所以蛙类的神经一肌肉标本常用以研究兴奋性、兴奋过程、刺激的一些规律和特性。
[实验动物] 蛙 (或蟾蜍)
[器材及药品] 解剖器械,锌铜弓,培养皿,烧杯,任氏液,棉花,线。 [方法及步骤]
1.破坏脑脊髓:取蛙或蟾蜍一只,用蛙针从枕骨大孔垂直插入,向前伸人颅腔,捣毁脑髓;向后插入椎管,捣毁脊髓。如果蛙处于瘫痪状态,表示脑和脊髓完全破坏。然后沿两侧腹部将蛙横断为上下两半。并将前半段弃去,保留后半段备用。
2.剥离皮肤:先剪去尾椎末端及泄殖腔附近的皮肤, 然后从脊柱的断端撕下皮肤,将其全部剥去,直至趾端。除去内脏,将标本放在滴有任氏液的蛙玻璃板上。将手及使用过的解剖器械洗净。
3.分离标本为两部分:沿脊柱正中线将标本匀称地剪成左右两半,一半浸入盛有任氏液的烧杯中备用,另一半作进一步剥制。
4.分离坐骨神经:在大腿背侧的半膜肌与股二头肌之间用玻璃分针分离出坐骨神经。注意:分离时要仔细用剪刀剪断坐骨神经的分支,向上分离至基部,向下分离到腘窝。保留与坐骨神经相连的一小块脊柱,将分离出来的坐骨神经搭于腓肠肌上;去除膝关节周围以上的全部大腿肌肉,刮净股骨上附着的肌肉,保留的部分就是坐骨神经及股骨。
5.分离腓肠肌:在跟键上扎一线,提起结线,剪断结线后的跟腱,腓肠肌即可分离出来。此时在膝关节下方将其他所有组织全部剪去,到此为止,带有股骨的坐骨神经腓肠肌标本制备完成。
6.标本的检验:将坐骨神经腓肠肌标本放置在蛙玻璃板上,用锌铜弓刺激坐骨神经,若腓肠肌迅速发生收缩反应,说明标本机能良好,制备成功。应及时移放入盛有任氏液的培养皿中,供实验之用。
[注意事项]
1. 剥制标本时,切忌用金属器械牵拉或触碰神经干。
2. 分离肌肉时应按层次剪切。分离神经时,必须将周围的结缔组织剥离干净。
3. 制备标本过程中,应随时用任氏液浸湿神经和肌肉,防止干燥。
4. 切勿让蟾蜍的皮肤分泌物和血液等沾污神经和肌肉,也不能用水冲洗,否则会影响神经肌肉的功能。
实验二 生物电现象的观察
[目的] 通过实验证明生物电现象的存在。
[原理] 电流的刺激作用于神经肌肉标本,由于产生生物电流,因而引起肌肉的收缩。而神经肌肉标本在损伤时或正在兴奋时,都有电位的改变,所以可把神经肌肉标本的神经放在组织损伤部与正常部之间,或放在正在兴奋的组织上,也能引起肌肉的收缩,从而证明损伤电位和动作电位的存在。
[实验动物] 蛙或蟾蜍
[器材及药品] 解剖器械,锌铜弓,玻璃针,任氏液
[方法与步骤]
一、实验准备操作 把先作好两个神经肌肉标本用锌铜弓检查标本是否正常。
二、实验项目
1. 将一个神经肌肉标本的神经的一点轻置于臀部肌肉的损伤部,另一点置于正常部,观察在接触时是否引起肌肉的收缩?
2. 将甲标本的神经放在乙标本的肌肉上,再用锌铜弓刺激乙标本的神经,观察是否引起乙标本的肌肉收缩。
[注意事项] 要求神经肌肉标本保持高度的兴奋性;标本制作好后应立即进行实验。
[实验结果] 蛙坐骨神经标本用锌铜弓刺激后肌肉收缩。
实验二 生物电现象的观察
[目的] 通过实验证明生物电现象的存在。
[原理] 电流的刺激作用于神经肌肉标本,由于产生生物电流,因而引起肌肉的收缩。而神经肌肉标本在损伤时或正在兴奋时,都有电位的改变,所以可把神经肌肉标本的神经放在组织损伤部与正常部之间,或放在正在兴奋的组织上,也能引起肌肉的收缩,从而证明损伤电位和动作电位的存在。
[实验动物] 蛙或蟾蜍
[器材及药品] 解剖器械,锌铜弓,玻璃针,任氏液
[方法与步骤]
一、实验准备操作 把先作好两个神经肌肉标本用锌铜弓检查标本是否正常。
二、实验项目
1. 将一个神经肌肉标本的神经的一点轻置于臀部肌肉的损伤部,另一点置于正常部,观察在接触时是否引起肌肉的收缩?
2. 将甲标本的神经放在乙标本的肌肉上,再用锌铜弓刺激乙标本的神经,观察是否引起乙标本的肌肉收缩。
[注意事项] 要求神经肌肉标本保持高度的兴奋性;标本制作好后应立即进行实验。
[实验结果] 蛙坐骨神经标本用锌铜弓刺激后肌肉收缩。
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