T7promotor工作原理

Question

如题所述

Answer 1

T7是启动子（T7 promoter），是来自于T7噬菌体的能够对T7RNA聚合酶有特异性反应的强启动子，是启动T7噬菌体基因转录的一段序列。

T7RNA聚合酶具有高度启动子专一性，且只会转录T7噬菌体中位于T7启动子下游的的DNA或DNA复制品。T7 RNA聚合酶能选择性的激活T7噬菌体启动子的转录，其合成mRNA的速度比普通大肠杆菌的RNA聚合酶快5倍左右。

注意：

启动子特异性

除了基于转录RNA的类型选择启动子外，还需要确保质粒上的启动子能在使用的宿主细胞中工作。因为不同细胞类型和组织中的转录机器不同，相应的启动子也不同。细菌的启动子只能在原核细胞中或者只能在同种菌或亲缘关系较近的菌株中工作。同样地，各种类型的真核细胞（哺乳动物，酵母、植物等）需要独一无二的启动子，并且很少有交叉。一般来说，相比真核细胞启动子，细菌中启动子的多样性和复杂度更低。

启动子不同，基因的表达状态可能也不同，一些启动子能一直保持活性状态，而另外一些会受到更严格的调控。受调控的启动子可能只在特定的组织或生长阶段起作用，启动子的开关可能还会受到诸如化学物质、环境温度、光照条件等环境因素的影响。

在细胞中，启动子受到很多其它调控因子的控制，如增强子、绝缘子和沉默子等，然而，有时也会发生一些错误的转录，这对细菌来说不算什么大事，但是会影响实验的结果，甚至如果你的目的基因表达有毒产物，则可能会杀死细胞。

为了避免这种情况发生，科学家创造了合成启动子，并且通常会融合一些其它的启动子元件，以便启动子能够被更严格地调控。