LB培养基的额配制和作用

Question

如题所述

Answer 1

探索LB培养基的秘密：配方、应用与差异

LB培养基，这个微生物学实验中的黄金液体，是大肠杆菌等细菌生长的摇篮。它不仅是液态，亦或是凝固后成为固体，因抗生素的存在，它更是细菌克隆的得力助手。这个名字，据说源于lysogeny broth，意为溶菌肉汤，承载了发明者Giuseppe Bertani的独特贡献。

配置艺术

要亲手调制出这一生命之源，你需要准备以下原料：10g的胰化蛋白胨，富含小分子蛋白质易于细菌吸收；5g酵母提取物，为细菌提供必需的氨基酸、维生素和微量元素；10g氯化钠，保持渗透压并提供无机盐。以下是详细的步骤：

精准称量: 将胰化蛋白胨、酵母提取物和氯化钠分别称取。
溶化融合: 在2/3体积蒸馏水中加入，用玻棒搅拌至完全溶解。
调至理想pH: 用1mol/L的NaOH溶液调至7.2，确保适宜的生长环境。
定容: 将溶液倒入量筒，加入适量水至所需体积。
琼脂加入: 固体培养基时，添加15-20g琼脂，加热融化后补足水分。
灭菌与分装: 分装后进行高压蒸汽灭菌，100Pa压力下保持20分钟，确保无菌。

在倒板环节，100ml的LB培养基加入1~1.5g琼脂粉，抗生素应在温度降至55℃时加入，确保其活性。倒板时，每15-20ml倒入一个培养皿，紫外照射10-15分钟后密封冷藏。

独特优势与区别

LB培养基凭借其丰富的氮源（蛋白胨）和微量元素（酵母提取物），成为理想的细菌生长平台。与琼脂培养基相比，LB液体状态利于大规模扩增和基因提取，而琼脂培养基则用于涂布筛选，如大肠杆菌的抗性筛选。

LB与营养琼脂培养基的差异在于配方：LB的黄金组合是10g/L胰蛋白胨、5g/L酵母提取物和5g/L氯化钠，而营养琼脂培养基则以牛肉膏、蛋白胨和琼脂为基本构成，各自适用于不同的实验目的。

无论是LB还是营养琼脂，它们都是微生物学家手中的魔法配方，为生命科学的探索提供了坚实的基础。