如何证明蛋白具有受体激酶活性

Question

如题所述

Answer 1

蛋白激酶(protein kinases)，是一类催化蛋白质磷酸化反应的酶。它能把腺苷三磷酸(Adenosine triphosphate, ATP)上的γ-磷酸转移并共价结合到特定蛋白质分子中某些丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基的羟基上，从而改变底物蛋白质及激酶的构象和活性。蛋白激酶内都存在一个同源的由约270个氨基酸残基构成的催化结构区。在细胞信号传导、细胞周期调控等系统中，各种蛋白激酶形成了纵横交错的网络，在细胞的生命活动中起了广泛的作用。

蛋白激酶按照对底物磷酸化位点的选择性，可分为受体酪氨酸激酶、非受体酪氨酸激酶、丝氨酸/苏氨酸激酶、细胞周期依赖型激酶等。理论上凡是能检测到磷酸化产物的方法均可用于蛋白激酶的生化活性检测。但每种检测方法都需要根据激酶和底物的性质作出相应调整。

蛋白激酶抑制剂按照是否与ATP结合位点的“铰链区”结合及是否结合激酶的活性构象可分为4种类型。其中I型和II型的抑制剂构成了最常见的ATP竞争性抑制剂。