用酶标仪检测两个波长,一个参比波长,一个波长,怎么算抑制率

如题所述

酶标仪双波长读板时同一块板会出现一些数据,以bio-rad酶标仪为例,当设置双波长后,结果会出现raw data和result data,raw data是波长的原始数据,而result-data是波长减去参比波长后的数据,计算抑制率应以result data为依据。设置参比波长是在波长的基础上降低本底及非特异性背景的干扰。
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第1个回答  推荐于2017-12-20
实验中波长的选择主要依赖于你要测的样品。样品在不同的波长下,对光的吸收值也不同,但都有一个吸收峰,一般选择吸收峰时的波长进行实验。比如同样是MTT法做细胞毒性实验,就有使用490nm和570nm两种波长选择,如果使用了DMSO作为试剂,在溶解后呈紫(红)色,在490nm有最大吸收值;而对于SDS和酸化异丙醇,则选用570nm(655nm作为参考波长)。
酶标仪波长设定还要看你用的是什么酶标仪,如果是光栅式单色器(可以1nm步进调节),就可以直接设定吸收峰的波长;如果是滤光片式单色器,因为受滤光片波长限制,有时你就需要选接近使用波长的滤光片,比如655nm,你就可能选用650nm的滤光片。本回答被提问者采纳
第2个回答  2017-09-22
1L,人家没问你酶标仪是什么,人家有说明书好吧?混分也得有点素质啊。 lz,酶标仪测定ELISA比Luciferase方便多了,因为不用加样啊... 你在96孔板上显色之后,加终止液,然后直接在机器上设好吸光度就测了,一块板1分钟就测完了。 比如,你是HRP-TMB显色,就设定吸光度为450nm,shake 5秒,然后每个孔1秒,测下去就好了。
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