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为什么有的质粒转染细胞后不表达
如题所述
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推荐答案 2017-03-28
没有与宿主细胞的染色体整合,目的基因被破坏。
首先要确定是否已成功转染,可以用带荧光的载体进行核实,如观察到荧光,这说明转染成功;
其次要核实载体本身在转染前是否存在问题,之前我们也遇到过类似情况,借的别人的载体,实际载体本身有问题,当然无法表达;
最后,要考虑转染试剂的问题,如是否过期,是否能正常工作等。
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质粒转染细胞后
,
不表达
的原因有哪些
答:
其次要核实载体本身在转染前是否存在问题
,之前我们也遇到过类似情况,借的别人的载体,实际载体本身有问题,当然无法表达;最后,要考虑转染试剂的问题,如是否过期,是否能正常工作等。
质粒转染细胞为什么不表达
,求助
答:
原因有很多可能:质粒上的目的基因被宿主系统破坏
;目的基因对应蛋白对细胞有毒害作用,被细胞反馈调节到抑制表达;
目的基因表达与细胞本身特点能力不符
;质粒载体选择与表达系统不合适;
检测方法有问题,有表达,但是没有检测出来
;……
质粒转染细胞不表达
的问题~
答:
我这么说是因为,膜蛋白确实不好提取,而且提取后可能空间构想改变了,你的抗体可能识别不了了,而标签蛋白是多肽,构象不会受影响,只要不被你的目的蛋白档上就行,所以你可以用标签蛋白的抗体杂交下,试试。一般最好把标签和目的蛋白融合
表达
一下 ...
转染细胞不表达
怎么补救
答:
答: 需要考虑的问题有: 1.你的细胞和
转染
的方法,是不是你的细胞本身就很难转染,
有些细胞
用脂质体转染率很低的。在求助时最好告知细胞和具体的转染方法和试剂。 2.
质粒
的纯度和质量:看你使用那种试剂盒提取的,我们的经验是使用Qiagen比国产的一些试剂盒差别很大。 3.pEGFP-N1可用来
表达
融合蛋白...
真核表达载体
转染
293,序列都正确,
不表达
是
什么
原因
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一般的话,原因答题是可以分为两种:①
不表达
,从基因上开始分析,无论是用那种宿主表达蛋白,真核表达或是原核表达,都要考虑到基因优化的层面,如果基因本身不适在此系统中表达,那么下游在怎么优化也是不表达的 ②表达条件的优化,
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