菌种保藏的方法

Question

如题所述

Answer 1

菌苗，多就是指我国特定的好多个菌种保藏管理中心的制成品菌苗，在液态氮情况下，盛装在安瓿管内。公司生产按我国规定，务必要我国特定的菌保管理中心购买菌种，不可选用外地人菌苗。

常见菌种保藏方式
1、菌种保藏基本原理
依据微生物菌种的菌苗生理学、生物化学特点，在人力造就的标准下尽可能减少微生物菌种体细胞的新陈代谢抗压强度，使体细胞基本处在休眠模式，生长发育繁育遭受抑止但又不会身亡，以降低菌苗的基因变异率。超低温、干躁、氧气不足、缺乏维生素a等自然环境标准都是有抑止微生物菌种的代谢作用。
超低温、干躁、真空泵是用以菌种保藏的关键方式。挑选储藏方式 时，最先应考虑到方式 可否长期性地维持菌苗原来的特点，另外也应兼具到方式 的经济发展和简单。在具体工作上，通常多种多样标准另外应用，以提升储藏实际效果。
2、菌种保藏流程
血压选择特点典型性的纯菌菌体；
血液明确储藏的适合菌体形状；
补充挑选最适合的储藏方式 ；
负重定期对储藏菌苗开展查验，观查是不是产生变化，若有转变，须改变储藏方式 ，储藏满期应立即开展移栽；
3、琼脂斜坡超低温储存法
（1）方式 ：
将常常应用的菌苗的典型性菌体打疫苗在斜坡（一些独特菌苗能用液体培养基）上，按照规定的温度和时间塑造，待充足生长发育后，把塑造好的新鲜菌苗用包装纸保好，为缓解培养液的水份挥发，增加储藏时间，可将菌种保藏管的棉絮塞换为橡胶塞。放到4℃上下的电冰箱中储藏。每过2~3月移栽一次，再次开展储藏。若用半固态高层住宅培养液穿刺术塑造，一般可储藏大半年——一年。有的乃至更长期。

（2）应用领域：病菌、酵母、霉菌储藏。
（3）特性：
优势是——简单，便于营销推广；一般不需要另挑选储藏用培养液；对大部分微生物菌种都可用；
缺陷是——储藏期过短；传代频次多，易产生基因变异及环境污染。
（4）常见问题：
储藏的菌苗应是性命魅力充沛的新鲜塑造物，最少应是第三代的塑造物。
储藏时，破伤风杆菌能用庖肉培养液；生孢梭菌用流体力学硫乙醇酸盐培养液。务必定期维护储藏菌苗冰箱的温度、环境湿度及其菌苗管的棉塞是不是松脱或长霉，若有出现异常应妥善处理。
每一次试管移植后，应与原菌苗的序号、名字逐一核查，确诊培养液特点和纯净度准确无误后再再次储藏。
储藏菌苗的培养液应低糖，别的食用菌含糖量低于2%为宜，以防产酸过多，影响菌苗生存。
铜绿假单胞菌在电冰箱极易产生菌体自溶而身亡，不适合用此方法储存。

4、液体石蜡储存法
此方法是用石腊将塑造物与气体阻隔，以减少菌苗的生理学生物化学水准，并可避免 水份挥发，进而增加菌苗的储藏期：
（1）方式
将菌苗打疫苗于斜坡或穿刺术于0.3~0.5%琼脂半固态高层住宅培养液中，塑造好预留。取化学纯的液体石蜡装在试管婴儿中，每管10~15mL，加棉塞，瓶塞包起纸，121℃高压灭菌30Min，取下置37℃温箱或110~170℃电烤箱中1~2h或空气干燥器内去除液体石蜡中的水份。
将所述液体石蜡添加塑造好的菌苗试管婴儿内，液体石蜡液位以高于培养液最上方1㎝为宜，将试管婴儿站立，放进4℃电冰箱中储藏。
（2）应用领域：适用储藏一部分霉菌，酵母和放线菌，对病菌储藏实际效果较弱。
（3）特性：本方式 简单易行，是试验室常见的一种储藏方式 ，该法关键使菌苗与气体阻隔。
（4）常见问题：
血压储藏时，用新鲜塑造物打疫苗，应查验纯净度和特点后，即可开展储藏；
血液储藏全过程中，需常常观查斜坡是不是干躁，如干躁，需再次移栽；
补充应用菌苗时，先将菌苗管歪斜使液体石蜡流至一边，再用接种针挑取塑造物打疫苗到新鲜斜坡上塑造，待长更新塑造物后，再移栽一次到新斜坡上就可以应用；
负重将沾有小量液体石蜡的接种针浸于95%乙醇中一会儿，再灼烧杀菌，以防立即在酒精喷灯下灼烧时，液体石蜡四溅，造成环境污染；
足月液体石蜡在菌苗管内高于培养液的高宽比要严控，如过多，会影响菌苗互换汽体，使储藏实际效果不太好；如太少，斜坡非常容易干躁，将减少储藏期。一般以高于斜坡1cm为宜；
软管制取无菌检测液体石蜡时，每管装量不可以过多，不然散装到菌苗培养液极易导致环境污染。