影响克隆基因表达的因素有哪些？

如题所述

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第1个回答 2008-11-24

取决于提供细胞核的亲本的基因形和克隆后子代的生存环境

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以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因,并使之在大肠杆...答：(1)必须利用原核细胞的表达调控原件。如细菌的RNA聚合酶不能识别真核生物的启动子。(2)大多数真核基因有内含子，这些内含子在转录后从前体mRNA中被切除而形成成熟mRNA。细菌细胞没有这样的机制来去除内含子。(3)没有翻译后的加工和修饰系统。(4)产生的真核生物的蛋白质产物可以被细菌的蛋白酶所识别...

请论述酶蛋白基因克隆,表达,蛋白纯化时须考虑的因素(救救孩子吧)_百度...答：如果是原核表达，需要考虑是表达可溶蛋白还是包涵体，这与表达量，温度，克隆时加不加tag都有关系。纯化主要就是保证酶活，尽量方便，快速，经济。这与目的有关，生产还是科研，纯度要求如何，相差很大。直接用发酵液的也有，简单沉淀的也有，多次电泳层析的也有。

从高等生物基因组中克隆的完整基因为什么在大肠杆菌中不能正确表达?答：真核生物与原核生物的启动子不同。而且真核生物的基因通常是间隔基因，即外显子和内含子相间排列。真核生物的完整基因直接转入大肠杆菌，没用相应的启动子不能启动mRNA转录，而且内含子也不能正确剪切，当然不能正确表达。利用胰岛素的mRNA进行RT-PCR，扩增出它的cDNA，再将cDNA连接在有完整表达单元的载...

请问:真核生物的基因在原核生物基因进行表达时的注意事项 有哪些?答：1，选对插入序列，克隆构建好后，测序，看你插入到原核载体中的序列是否正确、完整，有无移码和各种突变，起始密码子和终止密码是否正确；2，所选的表达体系是否合适，有时，你需要表达的基因可能来源于真核生物的线粒体或叶绿体，其中是否有稀有密码子，否则会影响表达效率，表达的蛋白是可溶的还是包涵体...

原核系统中影响外源基因表达效率的主要因素?答：影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素? 推荐答案 ⑴外源基因的拷贝数⑵ 外源基因的表达效率 ①启动子的强弱 ②核糖体接合位点的有效性 ③SD序列和起始密码ATG的间距 ④密码子组成⑶表达产物的稳定性 ⑷细胞代谢负荷 ⑸工程菌的培养条件设计构建一个载体,将目的基因在植物根系表达并向根细胞外分泌。请详细写出个步骤 ...

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