pc12细胞是什么细胞

如题所述

PC12细胞是一个常用的神经细胞株。PC12细胞株来源于一种可移植的鼠嗜铬细胞瘤,该细胞对神经生长因子(NGF)有可逆的神经元显形反应,该细胞不合成肾上腺素。PC12细胞系是来源于成年大白鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤的细胞系,培养PC12细胞系可观察PC12细胞动力学及其演化形成神经细胞与胶质细胞的过程。
研究培养PC12细胞动力学的主要方法是盖玻片培养法。在神经生长因子诱导的PC12细胞传代培养过程中,按一定时间间隔放置盖玻片。待PC12细胞铺满盖玻片,将其取出,经吉姆萨染色,在光学显微镜下可观察到培养PC12细胞随培养时间展开的演化过程。裸核PC12细胞是演化形成神经细胞和胶质细胞的共同的原始干细胞,其演化的最初表现为细胞质的出现,并逐渐增多,表面形成多数细小的营养性突起,而后PC12细胞系分化形成神经细胞演化系和胶质细胞演化系。狭义的PC12细胞是指分化成为神经细胞与胶质细胞之前的PC12细胞;广义的PC12细胞则包括狭义的PC12细胞及其演化所形成的所有神经细胞与胶质细胞。
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第1个回答  2020-11-10
这要看你的PC12是什么样的,是未分化还是高分化的,悬浮的需要离心后传代,以及贴壁生长的是需要胰酶消化的,而且看你的描述应该是贴壁的,你如果直接吹下来,这样对细胞的伤害很大。我用的是6cm盘养的,一般是用1ml胰酶,消化时间控制在1min内,然后加1ml培养基中和,接着吹打混匀。细胞难以吹散应该跟你直接吹下来有关,用胰酶消化会使细胞分散成单个的。
使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时PC-12细胞的电转染条件是:

对于0.2 cm电转杯,细胞密度为3x10^6 cells/ml,DNA用量为2μg,电转液体积为100μl,电压为130V, 电容为950μF。

对于0.4 cm电转杯,细胞密度为3x10^6 cells/ml,DNA用量为5μg,电转液体积为250μl,电压为240V, 电容为950μF
第2个回答  2021-04-13

第3个回答  2023-03-13

PC-12是大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞

该细胞系来自可移植的雄性大鼠的肾上腺嗜铬细胞瘤;表达神经生长因子(NGF)受体,NGF可诱导该细胞产生可逆性的神经表型。该细胞可产生儿茶酚胺、多巴胺和去甲肾上腺素,但不合成肾上腺素。

pc-12

基本信息

    细胞别称:PC 12; PC12

    细胞来源:肾上腺嗜铬细胞瘤

    细胞形态:多形态细胞样

    生长特性:疏松贴壁,有多细胞聚集体

    包装规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

    倍增时间:2~3天

    传代比例:1:3

    保藏机构:CCTCC; GDC0006

培养保存

    培养体系:RPMI-1640(TM175)+10%HS(TS600)+5%FBS(TS500)

    培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃

    冻存条件:完全培养基+8%DMSO +20%FBS(TS500),液氮保存

传代步骤

该细胞轻微贴壁和悬浮培养的细胞,传代可以参考以下方法:

    收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。

    加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

    将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

冻存步骤

    配置细胞冻存液,放置 4℃预冷;

    将培养瓶内细胞悬液用吸管完全吸出,转移到无菌离心管中,取细胞悬液计数;

    1000rpm 离心 10min,弃去上清,加适量细胞冻存液,重悬细胞;

    将细胞悬液分装到1ml冻存管中; ( 4℃预冷 30min)

    将冻存管转入程序降温盒中(程序降温盒需提前在 4℃预冷),于-80℃过夜;

    从程序降温盒中取出冻存管,快速转移到液氮中保存。

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