采用测定吸光值来测定叶绿素含量时，为什么要用乙醇作空白对照？

Question

1、取新鲜植物叶片，擦净叶片表面的污物，剪碎并去除中脉，混匀。
2、称取剪碎的新鲜叶片 0.2 g，共 3 份，分别放入研钵中，加入少量石英砂和碳
酸钙粉及 2-3 mL95%乙醇，研磨成匀浆，再加乙醇 10 mL，继续研磨至组织变白色，
静置 3-5 min。
3、取滤纸 1 张，放在漏斗中，用乙醇湿润，沿玻璃棒把提取液倒入漏斗中，过
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滤到 25 mL 棕色容量瓶中，用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣 3-4 次，最后连同残渣
一起倒入漏斗中。
4、用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中，直至滤纸和残
渣无绿色为止，最后用乙醇定容至 25 mL，摇匀。
5、把叶绿体色素提取液倒入光径 1 cm 的比色杯中，以 95%乙醇为空白，在波长
665 nm、649 nm 和 470 nm 下测定吸光值。

Answer 1

叶绿素是溶解在乙醇中的，就得用乙醇对照。

Answer 2

紫外可见分光光度计定量测定校零后还要测定空白对照的吸光度吗
紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度