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制备感受态细胞,在有氨苄的LB平板上长了很多菌,但是跑电泳却不见条带,这是什么原因。
不是跑PCR的问题,也不是引物的问题。我是新手T_T大家帮帮忙 ! 谢谢啦
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推荐答案 2014-07-10
长的菌是一个一个菌落分的很开的吗?如果是的话,建议从头重复一次实验。可能是实验操作问题。如果菌落不分开,那就再做一次后面的涂板挑克隆就可以了。
追问
菌落没有分开意味着什么呀
追答
意味着你的氨苄可能失效了,长的串起来了。那你就重新涂板,在养次菌就可以了。
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
当前网址:
http://55.wendadaohang.com/zd/IRe4LQQGRIQFIGe4Q44.html
其他回答
第1个回答 2014-07-10
有可能是你的氨苄失效,所以导致了杂菌或者假阳性的出现。
相似回答
用的大肠杆菌
感受态细胞
转化
,LB
培养基加KANA,提取质粒后
跑电泳有条
...
答:
跑出的条带胶回收后酶切?不应该没
有条带
~酶切不成功也应该有完整的质粒条带~你质粒
的条带
是否正确~正常应该有三条带~超螺旋最下面最亮~还有开环和线性~
pcr的关键性技术
视频时间 1:10
【
菌
周刊】菌种建库篇|大肠杆菌DH5α
感受态细胞的制备
答:
首先,将LB培养基在37℃下震荡培养,当A600值达到0.4至0.6时,菌体沉淀出来。小心离心,丢弃上清,然后用氯化钙(CaCl2)重新悬浮菌体,激活其
感受态
状态。接下来,分次离心和吸干上清,确保细胞充分接触CaCl2。再次离心去除多余溶液,细
菌细胞
被均匀悬浮在CaCl2溶液中。随后,将悬浮液分装,每份100微升...
pcr需要注意的问题
答:
1、PCR产物的
电泳
检测时间:一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚至消失。2、假阴性,不出现扩增条带 模板:模板中含有杂蛋白质,模板中含有Taq酶抑制剂,模板中蛋白质没有消化除净,特别是染色体中的组蛋白,在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。模板核酸变性不彻底。在酶...
几种
感受态细胞制备
的效果比较
答:
转化后在含抗生素的
平板上长
出的菌落即为转化子,根据此皿中的菌落数可计算出转化子总数和转化频率,公式如下:转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积 转化频率(转化子数/每mg 质粒DNA)=转化子总数/质粒DNA 加入量(mg)
感受态细胞
总数=对照组2菌落数×稀释倍数×菌液总...
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