请教：流式分选细胞前标本的处理以及注意事项

Question

如题所述

Answer 1

流式细胞计是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节分辨率为零。流式细胞计可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的，所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时，受到激光照射会向立体角为2π的整个空间散射光线，散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度及其空间分布与细胞的大小、形态、质膜和细胞内部结构密切相关，因为这些生物学参数又和细胞对光线的反射、折射等光学特性有关。未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射，因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变，其散射光信号当然不同于活细胞。散射光不仅与作为散射中心的细胞的参数相关，还跟散射角、及收集散射光线的立体角等非生物因素有关。在流式细胞术测量中，常用的是两种散射方向的散射光测量：①前向角（即0角）散射（FSC）；②侧向散射（SSC），

Answer 2

具体步骤都繁琐且每实验都尽相同能告诉些原则： 第步设计选标记表面抗体标记标记诱导细胞激影响游实验些都要弄明白 第二步选择所要用仪器兼容荧光素比实验室仪器没紫外激光选用紫外荧光才能激发荧光素仪器能识别 第三步准备单细胞悬液要根据实验材料培养细胞整块组织或者悬浮细胞同需要找自优化原则限度细胞且保持细胞处于非粘附状态 第四部染色 第五部选根据实验要求收集管或者9陆孔盘每孔细胞根据实验要求本回答被网友采纳