验证基因敲除?

某同学想要探究基因A在成年小鼠造血干细胞分化中的作用。他购买了基因A敲除的转基因小鼠,
请简述验证该转基因小鼠发生了基因A缺失的实验方法以及相关的注意事项?

1、提取转基因小鼠的RNA,以反转录后的cDNA为模板进行基因A的PCR。
2、对照实验:提取非转基因(野生型)小鼠的RNA,以反转录后的cDNA为模板进行基因A的PCR。
3、如果对照组能通过PCR获得基因A或基因A的保守区,而实验组无结果,说明在转基因小鼠中发生了基因A的缺失。追问

相关的注意事项?

追答

算是常规实验吧,非要说注意事项就是提取RNA过程中防止RNA降解,所用的溶液和器具都要经过处理,除去RNA酶。

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第1个回答  2020-09-22
探索验证与发育相关的基因,比方说,控制开花的基因我们假设是一个. 1、用某种方法把它敲除,即基因敲除,植物不开花了,那我们就可以说,这是控制开花的基因; 2、用反义RNA进行抑制,基因不表达了,也可以确定; 3、把这个基因克隆出来,转到另外一种生物上面,这种转基因生物能开花了,就可以验证了. 很简单吧?其实很难,确定一个基因要好多年.
第2个回答  2020-09-22
关于这个的话,其实我是不太了解的,因为这个我感觉是太专业性了,所以我从来不懂这些东西。
第3个回答  2022-06-29
基因敲除是用含有一定已知序列的DNA片段与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,整合至受体细胞基因组中并得到表达的一种外源DNA导入技术
第4个回答  2020-09-22
你的时候你会发现我的世界观是我的错觉,我的人生是一个人的生活方式的一个人的生活方式的生活
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