用液相做色谱柱,需要注意些什么?

如题所述

    注意冲洗系统

    注意冲洗色谱柱;

    注意冲洗进样口;

    注意清洗泵头

所有的目的都是为了不让无极盐析出。

因为磷酸盐的水溶性还不错,不过在有机物当中的溶解度就不好了。它遇到甲醇、乙腈容易析出。然后就会把液相管路堵住。

    比如,你的流动相是0.05mol/L的KH2PO4-乙腈,每天早上开始使用仪器前,还有每天使用完仪器之后要用10%的乙腈水冲洗。如果流动相是甲醇,要用甲醇水。

    如果系统里面是流动相,不可以直接冲甲醇、乙腈等纯有机相,需要用10%的甲醇(乙腈)水缓冲。也是防止盐析出。

    色谱柱也是一样的意思。一般来说250mm*4.6mm的色谱柱,1.0ml/min至少冲洗30min,最好40min。然后如果需要封存的话,再用纯甲醇或者纯乙腈封上。

    进样口,这个其实不太重要。主要看你的溶剂。如果你使用流动相溶解的。那么不管是手动进样,还是自动进样,每天实验结束之后,打一针纯水。进样量尽量大一点。

    泵头。这个如果是老实验员都知道,如果你的流动相里面含有大量的盐,尤其是有机相还是乙腈的时候,单向阀 特 别 容易堵住。如果有在线清洗泵头的装置的话一定记得使用。如果是手动的就没办法了。坏了的话就拿下来超声吧。


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