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怎么使用多功能酶标仪检测双荧光素酶报告基因
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推荐答案 2016-12-18
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如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
答:
在双
报告基因
系统中,通常一个报告基因用于检测特定实验条件下待测物的反应,即“实验”reporter,另一个报告基因用来检测实验条件,类似于内部对照,用于校准“实验”reporter的数据。通过这种方法,可减少内在的变化因素所削弱的实验准确性,例如:转染效率、细胞活性、细胞裂解差异以及加样操作过程中引起的差...
荧光素酶报告基因检测
答:
1、重组质粒制备: 制备含有待
检测基因
Luc/Rluc的重组质粒;2、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的
报告基因
和目的基因进行共转染,通常24-48h;(选择转染效率较高的HEK-293T细胞或原代细胞等)3、细胞处理:
双荧光素酶检测
试剂盒依照protocol操作;4、
荧光检测
:
使用酶标仪
或具有类似
检测功能
的设备进行荧光...
双荧光素酶
笔记
答:
第二种方案就是将荧火虫荧光素酶与海肾荧光素酶构建到一个载体上
,这样偏差更小,毕竟转染一个质粒比转染两个质粒要容易,在这方面,根据检索到的资料显示,现在的这类质比较有名的是Promega公司的pmirGLO质粒,图谱如下所示: 另外的质粒就是国产的,即复能基因的pEZX-MT06质粒,图谱如下所示: 答:首先要知道,插入的...
检测荧光素酶
的
酶标仪
有什么要求呢?
答:
荧光素酶
检测时,反应是一个很弱的自发光反应,无需外来光源,需要使用发光
检测仪
来检测。普通
酶标仪检测
的是吸光度,检测原理与荧光素酶完全不同,无法检测荧光素酶。参考:http://www.lumflu.com/A_Info.asp?id=29
检测荧光素酶报告基因
发出荧光的都有什么仪器?
答:
都很贵。推荐
荧光酶标仪
和荧光显微镜。Luminex是液体芯片测定,同时检测30个目的蛋白,定量,灵敏。荧光分光光度仪用途比较局限,不方便。荧光凝胶成像仪的对象是凝胶 液闪仪和luminex很像,但是只能检测一个蛋白或靶标 荧光酶标仪就是酶标仪,但是可以
检测荧光
信号,同时可以测定至少96个样品的单一靶标 荧光...
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