为什么要干法和湿法分离柱层析?

如题所述

一、湿法装柱

优点:

1、一般柱子装的比较结实,没有气泡。

2、硅胶内部的孔径是湿的,可以充分利用内部的表面积,所以负载量较大,节省材料。

缺点:

1、硅胶(固定相)的上表面的平整度和高度对装柱效果影响较大,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。

2、装柱速度较慢。

二、干法装柱

优点:

1、干法装柱速度较快。

2、干法装柱可以保证样品层较完整。

缺点:

1、最大的缺陷在于"走柱子"时,由于溶剂和硅胶之间的吸附放热(可以用手摸柱子明显感觉到),容易产生气泡。

2、硅胶内部的孔径是干的,不能利用内部的表面积,所以负载量较小,需要材料较多。

3、干法装柱时细硅胶上柱时容易发热。

扩展资料

实际应用中需采用以下措施解决干法、湿法装柱的缺点:

第一、干法装柱时硅胶一定要填结实。

第二、干法装柱时用较多的溶剂"走柱子",一定要到柱子的下端不再发烫,恢复到室温后再撤去压力。

第三、干法装柱时在硅胶的最上层填上一小层石英砂,防止添加溶剂时,使得样品层不再整齐。

第四、湿法装柱时硅胶(固定相)的上表面应保证要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,避免出现分离效果不好的现象。

参考资料来源:百度百科-干法装柱

参考资料来源:百度百科-湿法装柱技术

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