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¨è,以è¾å°å¨ç©å¦å°é¼ åå¤§é¼ ä¸ºå¥½)ï¼1.æ è解åå¨ç©,ååºèè,å
ç¨BSS æ´é¤è¡æ±¡.2.å5ml 注å°å¨ä¸æ¯,å¸åæ¶å液å,æ注å°å¨å¤´è½»è½»æå
¥è管ä¸,ç¨çº¿ç»³ç»æç¢åº,以é²æ¶å液æ¼åº,轻轻ææ¶å液注å
¥è管系ç»,并ä¸æ¶è½»æåèè,以便æ¶å液è¿å
¥èå°å¶ä¸;æ¶å液å¨èå
åç20ï½30 åå,å¨å¸åºæ¶å液çåæ¶å¹¶è½»æåèè,以使èç»èè±è½åæ¶å液å¸åº.3.å¾
å¸åæ¶å液å,注å
¥ç¦»å¿ç®¡ä¸,ä½é离å¿å离,ç¨RPMI 1640 å¹å
»åºå¹å
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¶å®å¹å
»åºä¸ºå¥½),è½è·å¾è¾çº¯çèä¸ç®ç»èåè·è¾å¥½çææ.ä¼ ä»£å¹å
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¶å0.02% EDTA æ··åæ¶å3ï½5 åé,å¾
ç»èå缩,便åæ¢æ¶å,å¼ææ¶å液,ç¨BSSæ´ä¸äºæ¬¡,注å
¥è¥å
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»1.å产åçæ°é²è带.å¦ä¸ç«å³å¹å
»å¯ä»¥ä¿åäº4âä¸,ä½ä¸å®è¶
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¶å®å¦èèåå¹¼ä½å¨ç©ç大è¡ç®¡,亦å¯ç¨äºå¹å
».2.å
ç¨ä¸é注å°å¨å¸æ¸©PBS 液注å
¥è带çéèä¸,æ´é¤æ®è¡,注å
¥å£å¤å®ç¨çº¿ç»³ç»æ,以é²æ¶²ä½è¿æµ.3.ç¨è¡ç®¡é³å¤¹ç´§è带ä¸ç«¯,ä»å¦ç«¯åèéèä¸å¾å¾æ³¨å
¥æç»æµåº¦ä¸º0.1%çè¶åé
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æ«ç«¯åºç°æ¶²ä½åç»æä¹,令å
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ç®ç»èçæ¶å液,注å
¥ç¦»å¿ç®¡ä¸,为è·åæ´å¤ç»è,å¯å注å
¥æ¸©PBS å²æ´2ï½3 次彻åºæ¸
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,å 1640 å¹å
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),æ¥ç§å°T-75 Falcon 产å¹å
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¨æ±åæ¶,æ¶éå¹å
»æ¶²å¶ææ¡ä»¶å¹å
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»æ¶²å,ä¹æ¯é两天æ¶éä¸æ¬¡,å¯è·å¾å¤éæ¡ä»¶å¹å
»åº.4.4000 转/å离å¿å,åéè¿0.22μm å¾®å滤è滤è¿,-20âå»åå¤ç¨(临ç¨åè解).å代å¹å
»ï¼1.åæï¼åæ°é²çè¾ä¸è
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ç¨Hanks 液æ´é¤è¡æ±¡.2.å¥é¤è¢«è,å离åºç®è´¨,åæ1 ç«æ¹æ¯«ç±³å°å,å 0.5%è¶åé
¶å®¤æ¸©ä¸æ¶å1 å°æ¶,æ¯é10 åéç¨å¸ç®¡å¹ææ¬æ¶²ä»¤æ¶åå
å.3.éè¿ä¸éé¢çº±ç½æ»¤è¿,ç½ç¼è¦æ±åªå
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¶.5.æ²æ·ç©ç¨å¹å
»æ¶²éæ¬å¹¶ç¦»å¿,åéæ¬,å离å¿,å
±ä¸¤æ¬¡.6.æ«æ¬¡æ²æ·ç©ä»ç¨å«æ10%å°çè¡æ¸
çDulbecco æ¹è¯Eagle æ°å¹å
»æ¶²éæ¬å,ç¨å¹æ.7.æ¥ç§äºéºææè¶åºå±çå¹å
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»å¤´1ï½3 å°æ¶ä¸,æ¯ç»è¡ç®¡å°æ®µåå
ç®ç»èæå
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ºç»èåæ纤维ç»èå´ä»å¨å¹å
»æ¶²ä¸æ¼æµ®.8.è¶æ¤æ¶,å¸é¤å¹å
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¢å±æç¹æ®å½¢æçç»èå²,è½æç»2ï½5 天.æ¯ç»è¡ç®¡å
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