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如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
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推荐答案 2016-07-22
实时荧光定量PCR
检测mRNA的表达,然后westernblot检测蛋白表达量.
首先你确定拿到了这两种细胞系,通过PCR反应证明一个是野生型一个是突变型,即snp。然后用试剂盒提取RNA,设计引物,采用半定量或绝对定量的方法,测定mRNA表达水平;然后另取细胞裂解,提取
总蛋白
,用
特异性
抗体检测蛋白表达量。
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如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
答:
实时荧光定量PCR检测mRNA的表达,然后westernblot检测蛋白表达量.首先你确定拿到了这两种细胞系
,通过PCR反应证明一个是野生型一个是突变型,即snp。然后用试剂盒提取RNA,设计引物,采用半定量或绝对定量的方法,测定mRNA表达水平;然后另取细胞裂解,提取总蛋白,用特异性抗体检测蛋白表达量。
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
?
答:
实时荧光定量PCR检测mRNA的表达,然后westernblot
检测蛋白表达量
。
western blot
如何
定量测定
细胞中
某
蛋白表达量
?
答:
7.检测:使用化学发光试剂或其他方法检测目标蛋白的信号
。
8.定量:使用影像分析软件,如ImageJ,分析带的灰度值
。为了校正加载差异,经常使用内参蛋白,如GAPDH或β-actin,进行归一化。根据得到的灰度值和内参的灰度值,计算目标蛋白的相对表达量。
如何
定位
细胞质中表达蛋白
答:
免疫荧光可以达到目的了.免疫组化可以看出蛋白在细胞核、细胞浆或细胞间质.如果要定位到比较大细胞器可能需要免疫荧光
,用特异蛋白抗体和细胞器抗体共染;在特殊显微镜比如激光共聚焦显微镜应该是可以看到的.不知道你的探针法是什么探针,如果是RNA探针,达不到定位的效果,因为检测mRNA都是胞浆中.
怎么
表征
一个细胞
上有特定的受体
蛋白
答:
表征
一个细胞
上有特定的受体
蛋白
主要目的是验证和量化细胞表面或内部的受体蛋白的存在。下面是一些常用的表征方法:1.流式细胞术 (Flow Cytometry)使用特异性抗体标记目标受体,并用流式细胞仪
检测
和分析
细胞中
受体
的表达
水平和细胞数量。2.免疫荧光/免疫组化 利用特异性抗体和荧光标记来在显微镜下观察和...
大家正在搜
要探知细胞内某一蛋白质的表达水平
鉴定细胞中蛋白质表达水平的方法
表达人类蛋白质最理想的细胞体系是
检测蛋白质表达水平的技术
人类蛋白最理想的表达细胞系
蛋白质的表达
人类蛋白质最理想的细胞体系
蛋白质进入细胞的方式
动物细胞特有的细胞器
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