胰岛素是治疗糖尿病的重要药物．图6是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图分析回答：

Question

胰岛素是治疗糖尿病的重要药物．图6是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图分析回答：（1）在图1中的①～⑩过程中发生了碱基互补配对现象的有______（填数字序号）．（2）进行过程②⑥⑦必需的酶依次是______．（3）⑥过程中必需的酶作用于图7中的______处；⑦过程中必需的酶作用于图2中的______处．（填“a”或“b”）（4）能否利用人的皮肤上皮细胞来完成①过程？原因是______．（5）图3 中A-D段表示质粒的某基因，影印区的长度相当于mRNA的长度．B表示与RNA聚合酶结合位点．请在图上方的方框内用箭头表示出RNA聚合酶在C上的移动方向．为使目的基因直接表达，目的基因插入的最佳位点是图中的______处．（填数字序号）（6）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是______．（7）判断某人患糖尿病的主要依据是______时的血糖浓度持续高于7.8mmol/L．最新研究表明糖尿病发生的根本原因是基因突变，那么将来根治糖尿病的方法有______等．

Answer 1

（1）②是反转录、④⑤是DNA复制、⑦是构建重组质粒、⑨是细胞增殖、⑩是表达人胰岛素．DNA分子复制（④⑤⑨）、反转录（②）、转录和翻译过程（⑩）中都可以存在碱基互补配对现象．
（2）②过程是以mRNA为模板，反转录为DNA，此过程需要逆转录酶．⑥⑥用限制酶切割质粒．⑦构建重组质粒，此过程需要DNA连接酶．
（3）⑥过程中所需要的限制酶和⑦过程中所需的DNA连接酶的作用对象DNA的磷酸二酯键，即a．
（4）皮肤上皮细胞中含有胰岛素基因，但是基因表达具有选择性，胰岛素基因在皮肤上皮细胞中不能表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA．
（5）图3 中RNA聚合酶结合位点位于基因的首端，B位于基因的首端．RNA聚合酶在C上的移动方向应该是由首端向末端方向移动．为使目的基因直接表达，目的基因插入③处．
（6）PCR技术扩增目的基因（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况）．PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA复制，需要模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），以指数的方式扩增，即约2n．
（7）正常人空腹时血糖浓度：3.9-6.1mmol/L，血糖浓度持续高于7.8mmol/L的人患糖尿病．现研究发现糖尿病发生的根本原因是基因突变，要根治糖尿病，可用基因治疗将突变的基因修饰，也可用胚胎干细胞移植根治．
故答案为：
（1）②④⑤⑦⑨⑩
（2）逆转录酶、限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶
（3）a     a
（4）不能；皮肤上皮细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA
（5）③
（6）耐高温
（7）空腹    基因治疗或干细胞移植