大肠杆菌转化后长得很慢，提质粒跑电泳条带很淡

Question

我是用的一种基因缺陷性大肠杆菌做感受态，然后将连接好的质粒转入(连好的质粒里含有缺少的基因片段),涂平板以后需要24h才有菌落长出，挑取单菌落接种液体的LB，也是需要20多小时才变浑浊，然后浑浊的菌液提质粒跑电泳，只有很淡的一条带，请问是什么原因？
平板是营养缺陷性的，只有导入质粒的大肠杆菌才可以生长，我做的空白对照没有长菌落，所以应该不是杂菌污染吧？请教各位

Answer 1

可能是转化效率低吧，或者虽然质粒转进去了，但生产的缺陷蛋白不能满足宿主细胞生长的需要，就长得慢了。

Answer 2

建议做一个菌种纯化，将你做的甘油管中的菌体在新的氨苄平板上划线，37度过夜培养待长出单菌落。