A260nm是核酸最高吸收峰的吸收波长,最佳测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围,稀释或浓缩样品,使之在此范围内;
如果吸光度小于0.05,检查是否存在操作因素(如移液不准确,样品内有悬浮物等)影响。DNA样品的A260 吸光度值是否>0.1。
(请注意,这个值跟仪器无关,核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因为样品中的杂质和颗粒这些不纯物的干扰通常会对光有一定吸收,其值<0.1)。
A230产生负值主要是由于在很低 DNA 浓度的溶液中的一些其他成分的干扰所导致的。在下一个测定中,需要降低样品的稀释度,A230的负值会被校正。
A260/A280比值可进行核酸样品纯度评估:纯DNA的A260/A280比值为1.8,纯 RNA的A260/A280比值为2.0。如果比值低,表示受到蛋白(芳香族)或酚类物质的污染,需要纯化样品。
A260/A230比值可进行核酸样品纯度评估:纯 DNA和RNA的A260/A230比值为 1.8 – 2.2。若比值小于1.8表明样品被碳水化合物(糖类)、盐类或有机溶剂污染,需要纯化样品。当 260/230<1 时,通常只有两种情况。一是胍盐污染,二是蛋白污染。
扩展资料:
当我们获得了Micro Drop超微量分光光度计检测结果后,对光谱的正确分析至关重要。
输出结果的含义:
1. A260nm——核酸zui高吸收峰的吸收波长。
2. A280nm——蛋白zui高吸收峰的吸收波长。
3. A230nm——是碳水化合物zui高吸收峰的吸收波长。
4. A340nm——是基线校准波长,为检测溶液样品的浊度和其他干扰因子。该值应该接近0.0。如果不是,表明溶液中有悬浮物,需要纯化样品。纯样品的A340一般是0。
参考资料来源:百度百科 ——脱氧核糖核酸
1,A260nm:是核酸最高吸收峰的吸收波长。
最佳测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围,稀释或浓缩样品,使之在此范围内;如果吸光度小于0.05,检查是否存在操作因素(如移液不准确,样品内有悬浮物等)影响。DNA样品的A260 吸光度值是否>0.1。
2,A230nm是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长。
比值可进行核酸样品纯度评估。纯DNA和 RNA的A260/A230比值为2.5。若比值小于2.0标明样品被碳水化合物(糖类)、盐类或有机溶剂污染,需要纯化样品。A230产生负值主要是由于在很低DNA 浓度的溶液中的一些其他成分的干扰所导致的。
测定DNA浓度时其他数字符号表示的意思:
1,A280nm
是蛋白和酚类物质最高吸收峰的吸收波长,比值可进行核酸样品纯度评估:纯DNA的A260/A280比值为1.8,纯RNA为2.0。如果比值低,表示受到蛋白(芳香族)或酚类物质的污染,需要纯化样品。比值=1.5相当于50%蛋白质/DNA溶液
2,A320nm或A340nm
为检测溶液样品的浊度和其他干扰因子。该值应该接近0.0。如果不是,标明溶液中有悬浮物,需要纯化样品。纯样品的A320一般是 0。
3,A260/A280和A260/A230
(1)是核酸纯度的指示值,纯度好的DNA,在pH7-8.5 下其比值应该在2.0 或2.5,A260 / A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280 nm。纯净的样品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。
(2)A230是多肽、芳香基团、苯酚和一些碳氢化合物的吸光度,A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物、多肽、苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 。A280是蛋白质的吸光度。
本回答被网友采纳