真菌怎么稀释?怎么确定稀释后的浓度?

如题所述

一般的要确定稀释后的浓度,需要逐级梯度稀释进行验证。
CP药典规定的稀释剂是0.9%无菌氯化钠加0.05%聚山梨酯灭菌后待用。

如果是非霉菌的真菌类,比如白色念珠菌,直接用无菌氯化钠梯度稀释。
如果是霉菌类,要在无菌氯化钠中加入0.05%聚山梨酯,以便孢子能快速脱落到稀释剂中。

那么何为梯度稀释呢?
举个例子:
现有菌悬液,用移液管移液枪移取1ml加入到9ml的稀释液中,这样就是1:10稀释,记10-1
再从10-1菌悬液中移取1ml到9ml稀释液中,这样就是1:100,记10-2
同理,直至10-7。
验证时候最好做10-4~10-8这个5个稀释等级。
分别从待验证稀释等级中移取1ml到无菌平皿中,倒入融化的改良马丁琼脂培养基,冷凝,25.5℃培养5d(2010版药典新规定)

一般的,就我来说,我试验的等级是10-5,也就是10-5的菌悬液中含有<100cfu菌。

希望对你有帮助。
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