常用于蛋白质多肽链N端.C端测定的方法有几种

Question

如题所述

Answer 1

常用于蛋白质多肽链N端测定的方法：

1、二硝基氟苯法（FDNB法）

2、二甲基氨基萘磺酰氯法zhi（DNS－Cl法）

3、异硫氰酸笨酯法（Edman法）

常用于蛋白质多肽链C端测定的方法

1、肼解法

2、还原法

3、羧肽酶法

扩展资料：

多肽合成是一个固相合成顺序，一般从N端即氨基端向C端即羧基端合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。

液相合成基于将单个N-α保护氨基酸反复加到生长的氨基成份上，合成一步步地进行， 通常从合成链的C端氨基酸开始，接着的单个氨基酸的连接通过用DCC，混合炭酐， 或N-carboxy酐方法实现。

参考资料来源：百度百科-多肽合成

Answer 2

一、N－末端分析：

1、二硝基氟苯法（FDNB法）

2、二甲基氨基萘磺酰氯法（DNS－Cl法）

3、异硫氰酸笨酯法（Edman法）

二、C－末端分析：

1、肼解法

2、还原法

3、羧肽酶法

扩展资料：

蛋白质由n端走向c端是指蛋白质生物合成过程中的氨基酸排列走向。

N端是“氮”，是—NH₂，读氨基；氨基是有机化学中的基本碱基，所有含有氨基的有机物都有一定碱的特性，由一个氮原子和两个氢原子组成。

C端是“碳”，是—COOH，读羧基。羧基是有机化学中的基本化学基，所有的含有羧基的有机酸物质都可以叫羧酸，由一个碳原子、两个氧原子和一个氢原子组成，化学式－COOH。

多肽合成是一个固相合成顺序一般从N端即氨基端向C端即羧基端合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。

参考资料：百度百科-多肽合成

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Answer 3

（1） N-末端测定法：常采用―二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。
①2，4―二硝基氟苯(DNFB或FDNB)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与―二硝基氟苯（―DNFB）反应（Sanger反应），生成DNP―多肽或DNP―蛋白质。由于DNFB与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNP―多肽经酸水解后，只有N―末端氨基酸为黄色DNP―氨基酸衍生物，其余的都是游离氨基酸。
② 丹磺酰氯(DNS)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯（DNS―Cl）反应生成DNS―多肽或DNS―蛋白质。由于DNS与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNS―多肽经酸水解后，只有N―末端氨基酸为强烈的荧光物质DNS―氨基酸，其余的都是游离氨基酸。
③ 苯异硫氰酸脂（PITC或Edman降解）法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰酸苯酯（PITC）反应（Edman反应），生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中加热时，N―末端的PTC―氨基酸发生环化，生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来，除去N―末端氨基酸后剩下的肽链仍然是完整的。
④ 氨肽酶法：氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶，能从多肽链的N端逐个地向里切。根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量，按反应时间和残基释放量作动力学曲线，就能知道该蛋白质的N端残基序列。
（2）C―末端测定法：常采用肼（jing）解法、还原法、羧肽酶法。
① 肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中除C端氨基酸以游离形式存在外，其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。
② 还原法：肽链C端氨基酸可用硼氢化锂还原成相应的α―氨基醇。肽链完全水解后，代表原来C―末端氨基酸的α―氨基醇，可用层析法加以鉴别。
③ 羧肽酶法：是一类肽链外切酶，专一的从肽链的C―末端开始逐个降解，释放出游离的氨基酸。被释放的氨基酸数目与种类随反应时间的而变化。根据释放的氨基酸量（摩尔数）与反应时间的关系，便可以知道该肽链的C―末端氨基酸序列。本回答被提问者采纳

Answer 4

常用于蛋白质多肽链N端.C端测定的方法有几种
(1)N-末端测定 　　A.二硝基氟苯法(FDNB，DNFB)：1945年Sanger提出此方法，是他的重要贡献之一。　　DNP-氨基酸用有机溶剂抽提后，通过层析位置可鉴定它是何种氨基酸。Sanger用此方法测定了胰岛素的N?末端分别为甘氨酸及苯丙氨酸。　　B.氰酸盐法：1963年Stank及Smyth介绍了一种测定N?末端的新方法，步骤如下：　　由于乙内酰脲氨基酸不带电荷，因此可用离子交换层析法本回答被网友采纳

Answer 5

N-末端分析1、二硝基氟苯法（FDNB法）2、二甲基氨基萘磺酰氯法（DNS-Cl法）3、异硫氰酸笨酯法（Edman法）C-末端分析1、肼解法2、还原法3、羧肽酶法