55问答网
所有问题
当前搜索:
蛋白电泳分离胶浓度的选择
琼脂糖凝
胶浓度的选择
与dna片段大小之间的关系
答:
一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA
电泳
迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝
胶浓度的选择
取决于DNA分子的大小。
分离
小于0.5kb的DNA段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1...
如何
选择
琼脂糖凝
胶的浓度
来
分离
DNA
答:
总体原则是:分子量大的DNA,
电泳
时使用浓度较小的凝胶反之亦反。
胶浓度
越大,电泳速度越小;若胶浓度偏高,可能跑不动,条带缩在一起;若胶浓度过低,可能跑得太快,同样分不开。可参考下面的对应关系:凝胶浓度(%) 线性DNA长度(bp)0.5 1000~30000 0.7 800~12000 1.0 500...
SDS-PAGE
蛋白电泳
手册
答:
基础配备:
电泳
缓冲液,如甘氨酸、Tris和SDS,它们是舞蹈的指挥棒;考马斯亮蓝染色液和脱色液,犹如
蛋白的
亮色和暗色调;分离胶,6%-15%的
浓度
梯度,负责蛋白的起舞路径;浓缩胶则像聚光灯,聚焦在表演中心。准备工作: 玻璃板的舞台布置,
分离胶的
精心调配与均匀混匀,凝胶的灌注和封口,凝固后的细致...
为什么SDS- PAGE
电泳
中
分离胶的
pH较浓缩胶高?
答:
在SDS-PAGE中,
分离胶
和浓缩胶中tris-Hcl的pH值不同,主要是因为它们的作用和配方不同。分离胶的主要作用是
分离蛋白质
,它的配方中含有更高
浓度的
Tris-Hcl,pH范围在8.9左右。这种高pH环境有助于使蛋白质更好地分离,因为蛋白质的带电性会随着pH值的升高而改变,使它们更容易在电场中移动。同时,...
跑western时不同
浓度的分离胶
对跑
蛋白
的影响
答:
如果
胶浓度
不同,
蛋白
在其中迁移的速率就不一样,所以如果采用裁膜的方式,对于蛋白迁移的位置要事先有个预判。10%的胶,浓度高,迁移慢一些,如果都在相同位置裁,这里看到条带,6,8%的胶,膜需要裁得更靠下缘。或者把之前裁掉的膜的下半部分再拿来做做实验试试。当然,
电泳
时的各种因素也会有...
SDS-PAGE
电泳
中,
分离胶
和浓缩胶的配方是不是只有Tris-Cl的PH不同?
答:
在sds-page不连续
电泳
中,制胶缓冲液使用的是tris-hcl缓冲系统,浓缩胶是ph6.7,
分离胶
ph8.9;而电泳缓冲液使用的tris-甘氨酸缓冲系统.在浓缩胶中,其ph环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而cl离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,
蛋白
分子就介于二者之间泳动....
在琼脂糖凝
胶电泳
过程中,如何
选择
琼脂糖
浓度
?
答:
琼脂糖凝
胶浓度
与线性DNA
分离
范围参数:凝胶浓度(%) 线性DNA长度(bp)0.5 1000~30000 0.7 800~12000 1.0 500~10000 1.2 400~7000 1.5 200~3000 2.0 50~2000 乐研生物,为您解答,希望能帮到你,望采纳!
分离胶
和浓缩胶的区别是什么
答:
2、分离胶:不连续缓冲体系聚丙烯酰胺凝
胶电泳
中的一部分,其组成、缓冲液pH和凝胶孔径与浓缩凝胶不同。它具有分子筛效应的小孔径凝胶。二、过程不同 1、浓缩胶过程:由于浓缩胶浓度低、孔径大,
分离胶浓度
高,孔径小。带电
蛋白质
或核酸离子在大孔径凝胶中运动时,阻力小,运动速度快。当接近小孔径凝胶...
WB实验中9%和11.5%的
分离胶
凝固时间是否不同
答:
SDS-PAGE
电泳
一、清洗玻璃板 二、灌胶与上样 1. 玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。2. 配 10%
分离胶
,加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。灌胶时,可用10ml枪吸取5ml 胶沿玻璃放出,待胶面升到绿带中间线高度时即可。然后胶上加一层水,液封后的胶凝的更快。3. 当水和胶...
我要检测的
蛋白
是100KD,配置了8%的
分离胶
,该用多大的电压来跑分离...
答:
2) 加入适量的1%SDS,混匀,100°C,5-10min。13400rpm,4°C,20min。3) 取上清于新管中。4) 测量浓度:采用分光光度法 BCA protein Assay Reagent A:500μl Sample: 5μl BCA protein Assay Reagent A:10μl PS:根据
蛋白的浓度
曲线得到相应的浓度。2. 跑胶 配
胶的
protocol和咱们...
棣栭〉
<涓婁竴椤
3
4
5
6
8
7
9
10
11
12
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜