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蛋白电泳分离胶浓度的选择
简述维生素c片剂含量测定过程中,造成相对平均偏差偏大的因素有哪些
答:
(3)在不连续
电泳
体系中,预电泳只能在
分离胶
乡合后进行。洗净胶面后才能制备浓缩胶。浓缩胶制备后,不能进行预电泳,以充分利用浓缩胶的浓缩效应。(4)电泳时,电泳仪与电泳槽间正、负极不能接错,以免样品反方向泳动,电泳时应
选用
合适的电流、电压,过高或过低无可影响电泳效果。(5)SDS纯度:...
凝
胶电泳
测
蛋白质
相对分子质量时,怎样才能将凝胶铺平
答:
是说扫胶吧?理论上来说染色脱色之后可能边缘有一点波浪起伏(尤其
分离胶
底部),不过应该不影响成像。侧迁移率的话最后用成像之后的照片测,而不是用尺子。没有成像系统就用相机照也可以,就算角度不好也可以用photoshop调回来,再用里面的标尺测。
PAGE的原理是什么?
答:
酸性
蛋白
通常在非变性凝
胶电泳
中采用的pH是8.8的缓冲系统,蛋白会带负电荷,蛋白会相阳极移动;而碱性蛋白通常电泳是在微酸性环境下进行,蛋白带正电荷,这时候需要将阴极和阳极倒置才可以
电泳分离
酸性蛋白 工作液配制1. 40%胶贮液(Acr:Bis=29:1);2. 4×
分离胶
Buf(1.5 M Tris-HCl,pH 8.8):18.2 g Trisbase 溶...
聚丙烯酰胺凝胶作为
电泳
支持物,有何优缺点?
答:
2. 根据样品分离目的不同,主要有三种处理方法:还原SDS处理、非还原SDS处理、带有烷基化作用的还原SDS处理。 3.聚丙烯酰胺的作用:丙烯酰胺与为
蛋白质电泳
提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否,与促凝剂及环境密切相关。4. 出现拖尾现主要是样品融解效果不佳或
分离胶浓度
过大引起的。 5.通常...
请教高手
电泳
为什么是
蛋白质
小分子跑在最下面
答:
〉脑谇埃蟮脑诤蟆lvias(站内联系TA)中和掉电荷后,凝胶的作用就类似于分子筛,以及你
分离胶浓度的
不同,
分离蛋白
大小的能力就不同,在
电泳
时,蛋白分子量小的跑的要快,离点样孔远,分子量大的则跑得慢,里点样孔近冼亮淀粉酶(站内联系TA)SDS可以与
蛋白质
结合,使得蛋白质带上比自己氨基酸残基...
如何消除非
蛋白质的
含N物质的影响
答:
将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上,加1/3体积的无离子水,打开下出液口,水流畅通,即刻将小烧杯中装有适宜
浓度的
凝胶液(凝
胶的
浓度过高会产生气泡,影响
蛋白质分离
速度,浓度过低易产生凝胶分层,影响
蛋白质的分离
效果)轻轻倒入层析柱中,凝胶自然慢慢沉降在层析柱底部,凝胶沉积直到离层析柱上端1.5-2cm处,停止装柱,剪...
连续
电泳
和不连续电泳有什么区别?
答:
\x0d\x0a\x0d\x0a不连续
电泳
由于浓缩胶的堆积作用,可使样品(即使是稀样品)在浓缩胶和
分离胶
的界面上先浓缩成一窄带,然后在一定
浓度
(或一定浓度梯度)的凝胶上进行分离。由于不同孔径凝胶的分子筛作用,使不连续电泳的分辨率大大高于连续电泳。虽然不连续电泳在缓冲系统
的选择
和制胶(特别是梯度...
不连续
电泳
是什么意思?
答:
由于浓缩胶的堆积作用,可使样品(即使是稀样品)在浓缩胶和
分离胶
的界面上先浓缩成一窄带,然后在一定
浓度
(或一定浓度梯度)的凝胶上进行分离。由于不同孔径凝胶的分子筛作用,使不连续
电泳
的分辨率大大高于连续电泳。虽然不连续电泳在缓冲系统
的选择
和制胶(特别是梯度胶)的操作方面比较繁杂,但它可以...
连续
电泳
和不连续电泳有什么区别
答:
\x0d\x0a\x0d\x0a不连续
电泳
由于浓缩胶的堆积作用,可使样品(即使是稀样品)在浓缩胶和
分离胶
的界面上先浓缩成一窄带,然后在一定
浓度
(或一定浓度梯度)的凝胶上进行分离。由于不同孔径凝胶的分子筛作用,使不连续电泳的分辨率大大高于连续电泳。虽然不连续电泳在缓冲系统
的选择
和制胶(特别是梯度...
SDS-PAGE
分离胶
-浓缩胶配方
答:
CH>2ICONH>2,是和碘乙酸一样,可通过下列反应不可逆地抑制SH酶类的物质。1)根据目的
蛋白的
分子量大小
选择
合适的凝
胶浓度
,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的
分离胶
(即下层胶):注:如果配制非变性胶,参考上述配方,不加10%SDS即可配制成非变性PAGE胶。1)按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称堆积...
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