55问答网
所有问题
当前搜索:
考马斯亮蓝法测蛋白质含量原理
求助
考马斯亮蓝法测蛋白质
的浓度
答:
计算所得结果为样品总氮量,如欲求得 样品中
蛋白含量
,应将总氮量减去非蛋白 氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量,即用样品中蛋白氮乘以6.25即得。二、双缩脲法(biuret法)(一)实验
原理
双缩脲(nh3conhconh3)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性...
(Bradford法)测定
蛋白
浓度的试剂盒叫什么?
答:
G-250(Coomassie brilliant blue G-250)法研制而成,实现了蛋白浓度测定的快速、稳定和高灵敏度。其
原理
是
考马斯亮蓝
G-250 在酸性条件下和
蛋白质
结合,使得染料最大吸收峰从 465nm 变为595nm,在一定的线性范围内,反应液 595nm 处吸光度的变化量与反应蛋白量成正比,测定 595nm 处吸光度的...
考马斯亮蓝法测蛋白质含量
用到哪些仪器
答:
2—5分钟即呈最大光吸收,至少稳定1小时。在0.01—1.0 mg
蛋白质
/ml范围内均可。该法操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间差异大,且标准曲线线性差。高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、硫酸铵和去污剂时测定有干扰。缓冲液浓度过高时,改变测定液pH值会影响显色。
考马斯亮蓝
...
蛋白质
中角蛋白含量较高的话,用什么方法
测蛋白含量
比较简单准确。_百 ...
答:
Folin-酚试剂法(Lowry):利用
蛋白质
分子中酪氨酸和色氨酸残基 (酚基)与还原酚试剂(磷钨酸-磷钼酸)起蓝色反应。1951 年, Lowry 对此法进行了改进,先于检测样品中加碱性铜试剂,再与酚试 剂反应,提高了灵敏度。灵敏度1ug
考马斯亮蓝
染色法:与氨基黑和考马斯亮蓝结合呈色,与考马斯亮蓝 ...
常用的
蛋白质含量
测定方法有哪些
答:
蛋白质浓度(mg/ml)=1.24E280-0.74E260 (280 260为角标)⑤色素结合法(Bradford 法)直接测定法:利用蛋白质与色素分子(Coomassie Brilliant Blue G-250)结合物的光吸收用分光光度法进行测定。
考马斯
亮兰(CBG)染色法测定
蛋白质含量
。CBG 有点像指示剂,会在不同的酸碱度下变色;在酸性下是...
可溶性
蛋白质含量
的测定的注意事项
答:
可溶性
蛋白质含量
的测定的注意事项:进行测定时,加Folin—酚试剂时要特别小心,因为该试剂仅在酸性pH条件下稳定,但上述还原反应只在pH=10的情况下发生,当Folin一酚试剂加到碱性的铜—蛋白质溶液中时,必须立即混匀,以便在磷钼酸—磷钨酸试剂 被破坏之前,还原反应即能发生。
考马斯亮蓝
G-250在游离...
蛋白质
颜色反应的基本
原理
、操作和方法的灵敏度、定量范围以_百度知 ...
答:
实验现象:有黄色沉淀析出。 注意事项:浓硝酸浓度不应低于40% 。 这个方法是作为蛋白质的定性试验,一般不用它来测定
蛋白质含量
,原因是不知道一个蛋白质里面含有多少苯丙氨酸和酪氨酸,灵敏度很高,但是不存在定量范围这一说。如果要定量,现在通用的是
考马斯亮蓝法
(Bradford法)。
国家标准检测
蛋白质含量
测定方法
答:
②双缩尿法:灵敏度低,多肽键+碱性Cu2+=紫色络合物,不同
蛋白质
的显色相似 ③紫外吸收法比较灵敏,蛋白质的中的络氨酸和色氨酸残基在280nm出的光吸收 ④Folin-酚试几法(lowry法):灵敏度高,磷钼酸-磷钨酸试剂被tyr和phe还原,不同蛋白质不同的颜色深浅变化不同 ⑤
考马斯亮蓝法
(bradford法...
测蛋白
浓度的方法
答:
不加标准蛋白溶液,在室温下放置30分钟,以未加
蛋白质
溶液的第一支试管作为空白对照,于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。4、紫外吸收法:大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收,这是由于蛋白质中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,可用于测定0.1~0.5mg/mL
含量
的蛋白质溶液。
比色法测定
蛋白质
浓度时,需要做哪些空白对照?
答:
1h内以0号管为空白对照。
考马斯亮蓝
(CoomassieBrilliantBlue)法测定
蛋白质
浓度,是利用蛋白质—染料结合的
原理
,定量测定微量蛋白浓度快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。目前,这一方法是也灵敏度最高的蛋白质测定法之一。
<涓婁竴椤
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜