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western结果如何分析
内参配制方法
答:
将各样品目的蛋白量分别除以其内参含量,得到的数值即为内参校正后的各样品中目的蛋白相对含量,再用此数值进行样品间的比较和
分析
,得到目的蛋白含量在不同样品间的实际变化
结果
。如果样品量充分,可以先检测内参,观测样品间内参显色条带是否一致,根据差异大小调整各样品的上样量重新进行
Western
Blotting...
western
blotting 的过程和原理
答:
Western
Blot原理、显色分类及操作步骤一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物...
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
可是由于经费限制或者偷懒的原因,国内的不少人做
Western
Blot往往省略参照,导致结果出现问题时无法
分析结果
――即便有结果也可能影响结果的分析。内参是最容易被忽略的一项。我们知道,要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础...
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
可是由于经费限制或者偷懒的原因,国内的不少人做
Western
Blot往往省略参照,导致结果出现问题时无法
分析结果
――即便有结果也可能影响结果的分析。内参是最容易被忽略的一项。我们知道,要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础...
western
blot中的CM是什么东西
答:
Western
免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上b,然后利用抗体进行检测。对已v知表达蛋白,可用相应抗体作为6一s抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分7的抗体检测。一p、原理 与mSouthern或Northern杂交方3法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针...
western
-blot信号趋势不一致 前提条件一样 蛋白量等都一样,就是曝光...
答:
同一批样品?还是不同批次的样品?如果是同一批样品,则可能是转膜时没贴紧导致电流分配不均或显色过程中显色液加得不均匀造成的。如果不是同一批样品就没什么比较性了。
生物信息学笔记-术语篇
答:
其优点是方法简便、标本可长期保存、
结果
便于比较,故被广泛应用于分子生物学等领域,成为一种常用的一种研究方法。保守性一般是在进化理论中应用较多,“保守性好”指的是发生突变的几率低。以蛋白为例,一般用于进化或物种亲缘关系
分析
的蛋白都含有可变部分——非保守区,和稳定部分——保守区。顺式作用元件(cis-...
蛋白marker为什么能作为显色条带
答:
近些年由于下游蛋白操作的丰富化与复杂化,也出现带有“尾巴”的蛋白标准。比如His-Tag,如果每个Marker条带都有His –tag,那二抗添加His-Taq抗体很容易将Marker条带显示在
Western结果
上。很方便,问题就是有可能有潜在的干扰,比如样品中正好有类似Histag的结构。不过这可以通过对照检测的。
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
可是由于经费限制或者偷懒的原因,国内的不少人做
Western
Blot往往省略参照,导致结果出现问题时无法
分析结果
――即便有结果也可能影响结果的分析。内参是最容易被忽略的一项。我们知道,要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础...
Western
Blot为什么必须要用内参
答:
Western
Blot 实验设计中要求有 良好的参照体系,对实验
结果分析
是非常有用。特别是当实验出现问题时,借助参照体系很容易就 可以查出问题所在,而不必抓耳挠腮怨天尤人。良好的参照体系通常包括 分子量 Marker (用来确定 蛋白条带对应的分子量大小),空白载体对照(如果是诱导表达体系还应该有诱导前的...
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