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pcr和westernblot
RT-
PCR
,
Western blot
和ELISA三者的区别
答:
基因翻译蛋白质,
PCR
可以检测基因的表达量,绝对定量和相对定量。但基因翻译表达蛋白质是个复杂的过程,有可能出现基因量大而蛋白质少,或者相反,甚至其他情况。所以,PCR是从基因层面DNA或mRNA进行的检测,而
Western Blot
是目前一种结合内参对蛋白质进行半定量的方法,Elisa可以定量检测某些蛋白、激素等 虽...
宝藏!转基因株系检测的N种方法
答:
荧光定量PCR,如Taqman探针法和SYBR Green I法,不仅用于相对表达的定量,还能进行绝对拷贝数鉴定和基因型识别,是检测的黄金标准。图1-5犹如解码器,展示了PCR体系的运作,以及qRT-
PCR和Western blot
的直观演示。SDS-PAGE和Western blot技术联手,通过蛋白电泳和抗体检测,揭示蛋白表达的动态变化,如FIE蛋...
荧光定量
PCR与western blot
在目的上的区别
答:
Western blot
是用抗体检测蛋白质,是已经又DNA转录成mRNA,最后翻译的蛋白质的水平。荧光定量
PCR和Western
blot完全是两个不同的概念。
RT-
PCR
,
Western blot
和ELISA三者的区别
答:
RT-
PCRWestern blot
ELISA三者区别 PCR转录水平检测目基,非蛋白,转录翻译复杂程,基表达量与蛋白表达量定相关. WB能半定量,检测细胞膜蛋白,点ELISA做 ELISA用定量检测蛋白,说观察同浓度刺激物目蛋白影响 基翻译蛋白质, PCR检测基表达量绝定量相定量基翻译表达蛋白质复杂程能现基量蛋白质少或者相反甚至其...
western blot
和 RT-
PCR
呈相反趋势怎么回事
答:
从翻译水平上抑制了这个蛋白的表达。发育中后期由于另外一些因子或者蛋白的表达,解除了该抑制因素的调控,蛋白表达会逐渐回复。所以说
Western blot
和 RT-
PCR
一般结果趋势还是相一致的,当然如果存在着其他调解的情况,如转录后,或翻译后水平的,也不排除这种可能性。需要多次重复实验。
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
答:
实时荧光定量
PCR
检测mRNA的表达,然后
westernblot
检测蛋白表达量.首先你确定拿到了这两种细胞系,通过PCR反应证明一个是野生型一个是突变型,即snp。然后用试剂盒提取RNA,设计引物,采用半定量或绝对定量的方法,测定mRNA表达水平;然后另取细胞裂解,提取总蛋白,用特异性抗体检测蛋白表达量。
做好
westernblot
需要注意各种细节,转给需要的你!
答:
做好
Western
需要注意各种细节。工欲善其事,必先利其器,首先还是从蛋白提取开始谈起。 1.收样前3min先配制细胞裂解液(现配现用),RIPA:蛋白酶抑制剂:磷酸酶抑制剂=99:1:1。6孔板收集蛋白每孔需200ul,计算用量。以收集六孔蛋白为例,按比例加入RIPA 1200ul,蛋白酶抑制剂12ul,磷酸酶抑制剂12ul,混匀后置于冰上...
RT-
PCR
,
Western blot
和ELISA三者的区别
答:
定量
PCR
应用于核酸扩增,检测模板核酸的含量。WB一般是用来做蛋白定性的,或者可以做半定量。ELISA一般用来做定量,可以读取数值。检测什么抗原抗体之类的,就常用ELISA。它在原理上和WB基本一致。都是抗原抗体反应。
求助
pcr和western
之间的联系与区别
答:
Western blot
检测的是蛋白水平,而RT-
PCR
检测的是mRNA,即基因水平的变化,一般来说,二者是平行关系,即基因水平的变化会引起蛋白水平相应的变化,但是从基因到蛋白也存在修饰等因素存在而出现基因水平升高而蛋白水平没有变化的情况,所以二者反应的是不同层次的变化。回复:这只是从不同的角度来分析,...
western blot
和 RT-
PCR
呈相反趋势怎么回事
答:
和蛋白的半衰期有关,mRNA和蛋白的水平变化并不一定是完全同步的。再增加几个时间点看看。通常有mRNA水平变化就能说明问题了,但是是否能检测到对应的蛋白水平变化,取决于时间点 的选择。
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