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测蛋白浓度的方法
蛋白浓度
测定
的方法
具体有哪些?
答:
蛋白浓度测定的方法:1. 紫外分光光度法
紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法,不需要任何试剂,操作简单且易回收。蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收,这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的,所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取过程...
测蛋白浓度的方法
答:
测蛋白浓度的方法有:凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法、紫外吸收法
。1、凯氏定氮法:凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸...
说明常用
蛋白质
测定
方法
的原理,并对各种方法加以比较
答:
双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法
,硫铵不干扰显色,Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。利用标准蛋白溶液和双缩脲试剂绘制标准曲线,将待测血清与硫酸钠在待测试管中混合,并只加入硫酸钠不含血清的试管作对照,将两支试管加入...
简述几种
蛋白质
含量的测定
方法
及原理。
答:
【答案】:蛋白含量的测定常用的方法有:考马斯亮兰G-250染色法、双缩脲法、福林一酚试剂法、紫外吸收法
。(1)考马斯亮兰G-250染色法:考马斯亮兰G-250在酸性溶液中为棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色,在595nm处有最大的光吸收,其颜色深浅与蛋白质浓度成正比。因此可比色测定,测定范围为...
如何测定
蛋白浓度
答:
6种方法测定蛋白质含量
一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法
样品与浓硫酸共热.含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨.经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量.若以甘氨酸为例,其反应式如下:nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+...
蛋白质浓度
测定
方法
答:
蛋白质浓度
测定
方法
:UV法,BCA法,考马斯亮蓝法等。1、UV法。这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg 公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接
测试蛋白 质
。从而显得结果很不稳定。蛋白质...
利用lambert-beer定律进行
蛋白质
定量分析,有几种测定
方法
?
答:
1、吸光度法(Absorbance Method):这是一种最常用的蛋白质定量
方法
,通过测量溶液在特定波长下的吸光度来计算
蛋白质浓度
。吸光度与溶液中的蛋白质浓度成正比,因此可以通过已知的蛋白质吸光系数和稀释倍数来计算蛋白质浓度。2、荧光光谱法(Fluorescence Spectroscopy):荧光光谱法是一种基于蛋白质分子内或...
蛋白质浓度
测定
方法
答:
蛋白质浓度测定方法如下:
1、双缩脲法
检测原理:双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物,在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色络合物,此反应即为双缩脲反应。含有两个或两个以上肽键的化合物都具有双缩脲反应。蛋白质含有多个肽键,在碱性溶液中能与Cu2+ 络合成紫红色化合物(540nm)。其颜色深浅与...
蛋白质
含量的测定
方法
答:
一、直接测定UV法:这种
方法
是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg公式,光度计可以直接显示出样品的
浓度
,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接
测试蛋白质
。从而显得结果很不稳定。蛋白质直接定量方法,适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白...
常用的
蛋白质
含量测定
方法
有哪些
答:
蛋白质浓度
(mg/ml)=1.24E280-0.74E260 (280 260为角标)⑤色素结合法(Bradford 法)直接测定法:利用蛋白质与色素分子(Coomassie Brilliant Blue G-250)结合物的光吸收用分光光度法进行测定。考马斯亮兰(CBG)染色法测定蛋白质含量。CBG 有点像指示剂,会在不同的酸碱度下变色;在酸性下是...
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