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什么是悬浮细胞传代的直接法和离心法,两者各有什么优缺点?
如题所述
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第1个回答 2012-12-04
是用酶液使贴壁细胞消化悬浮后传代吗?
直接法保留了酶液,可能对细胞的生长有一定的影响。离心法中悬浮吹打细胞后有离心操作,使细胞沉淀,去除上清液再加培养基,也就除掉了酶液。但是会损失细胞,如果rp不好或操作有瑕疵,可能细胞会丢失严重,甚至传代后找不到细胞了。这个我研究过的,因为最近也在做传代和原代,欢迎交流。本回答被提问者采纳
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为
什么
要进行
传代
培养?
答:
1、悬浮生长细胞传代 多采用离心法传代
。1000转/分,20-30秒后去上清。沉淀细胞加新培养液后再混匀传代。亦有直接传代法,即悬浮细胞沉淀在瓶壁时,将上清培养液去除1/2-1/3,然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。2、半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)此类细胞部分呈现贴壁生长现象,但贴壁不牢,可...
细胞传代
——步骤、注意事项、概念解释
答:
在生物实验的舞台上,细胞传代如同生命的接力,旨在增加细胞数量,保持活力,确保实验的精确性和有效性
。这一过程的核心在于理解细胞密度的动态平衡和适宜的培养环境管理。实验目标:首要任务是通过传代培养,既满足细胞数量的增长需求,又巧妙地避免细胞因过度密集而衰老或死亡。这一过程的关键在于科学的步骤和...
谁有
细胞传代
培养具体的操作步骤和注意事项
答:
悬浮细胞
可采用加入等量新鲜培养基后
直接
吹打分散进行
传代,
或用
离心法
后,加入新培养基后再吹打分散进行传代 贴壁细胞实验需准备超净台喷洒酒精,紫外照射30min。准备好培养瓶/皿,离心管,10%DMEM,0.25%胰酶,D-hanks液等,带上手套,口罩等,倒去旧培养基,用D-hanks液清洗一遍,去除沉积的死细胞...
悬浮
生长的
细胞
如何进行
传代
培养
答:
先将
细胞直接
倒入50毫升或者量少的话15毫升 移液管中,离心800rpm 5min 弃上清,用PBS清晰两次(每次加PBS后将细胞打匀
,离心,
弃上清,重复两次)然后加培养基,计数,培养
传代细胞的
培养步骤
答:
2、
悬浮型细胞
(suspensioncell)(1)吸出细胞培养液,放入离心管中
,离心
1000rpm5分钟。(2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。3、融合瘤(hybridoma)有些hybridomacell需培养三天以上才会产生抗体,若是更换培养基,则可能会失去抗体。
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