酶切后沉淀的方法

Question

我把质粒酶切后想沉淀,但不知道步骤,请问沉淀的步骤和方法是怎样的?

Answer 1

最好是采用切胶回收，使用胶回收试剂盒很方便的。
如果没有试剂盒也可以用等体积酚氯仿抽提，再加入十分之一体积3M NaAc（pH5.2），2.5倍体积无水乙醇，－20度沉淀过夜，12000rmp离心后用70％乙醇洗涤后加TE溶解。

Answer 2

加2.5倍体积的冰冷乙醇，颠倒混匀，12000rpm离心10分钟即可本回答被提问者采纳

Answer 3

酶切后最好跑电泳回收条带再做后续试验。否则酶切体系里的一些离子会影响dna稳定性的。