做液相时先用百分之三十乙腈冲洗，然后用纯已腈冲洗，冲洗完色谱柱在做样峰型为什么变了，而且保留时间

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第1个回答 2015-08-09

流动相是什么，峰型和保留时间怎么变化的

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高效液相色谱柱在作样前和作样后如何平衡答：这些柱子保存在有机相中，比如甲醇、乙腈里面比较好，所以封存的时候大多用甲醇或者乙腈封存色谱柱。而反相的流动相大多数都是缓冲盐的溶液，这些无机盐溶液在纯有机相中容易析晶，所以中间会有一个10%的甲醇水（或乙腈水）作为缓冲。所以每次使用前：先用1.0ml/min的流速冲洗30min的10%甲醇水，然后...

用含有三氟乙酸的乙腈过完柱子需要再用纯乙腈冲洗吗答：直接用乙腈冲洗色谱柱的话会使色谱柱中残留含盐液体中水分被乙腈取代,而盐在乙腈中不溶,从而使盐在色谱柱中析出,堵塞色谱柱

怎么清洗高效液相的色谱柱答：这个是不是需要清洗的问题，需要看你的流动相是什么。一般反相色谱，经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐，那就没必要冲洗了。冲洗方法：反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面，但是...

用乙腈做流动相出峰很快是什么原因答：出峰顺序是极性大的先出峰，极性小的后出峰。因为留在固定相上的物质是极性小的物质，所以用极性溶剂来洗保留时间就会增大。反相色谱柱水的极性是最大的，甲醇乙腈的极性算是很小的。你可以这样理解，极性小的物质应该出峰比较晚，但是用了同样极性很小的乙腈作为流动相，所以出峰速度就快了。

液相色谱柱答：但是含有缓冲盐的时候，最好是梯度洗脱好，就像你说的一般是先用10％的甲醇洗20分钟左右等基线平了，换80％的甲醇洗20～30分钟等基线平了，再换成纯甲醇冲洗30分钟左右基线平了就可以了，不用换成乙腈的。除非柱子很脏，这时需用先用甲醇系统洗完后再用乙腈系统冲洗。

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