1,蛋白质分子中含有的肽键在碱性条件下可以与Cu2+整合形成蛋白质-Cu2+复合物,即发生双缩脲反应。
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而此复合物中的含酚羟基的酪氨酸或色氨酸残基可以还原Folin-酚试剂的磷钼酸盐-磷钨酸盐,产生蓝色化合物,即发生Folin-酚显色反应。同时,在碱性条件下Folin-酚试剂极不稳定,从而易被蛋白质还原而成蓝色反应。
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2,在一定浓度范围内,蓝色化合物的蓝色深浅与蛋白质浓度成正比。故通过测定相应浓度梯度的蛋白质标准溶液吸光度可依其作出标准由线,以此绘制的标准有线和供试品中蛋白质溶液吸光度可求出供试品中蛋白质的含量。
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