动物细胞培养反应器的发展趋势

如题所述

第1个回答  2016-06-03

1、以代谢流分析为核心的生物反应器
长期来发酵过程优化与放大所依据的基本思想和方法是采用经典动力学为基础的最佳工艺控制点为依据的静态操作方法,实质上这只是化学工程宏观动力学概念在发酵工程上的延伸。例如,用氨水调节pH时,关心的是最佳pH值,却不注意氨水加量的动态变化及其与其他参数的关系。在溶解氧浓度(DO)测量与控制时,关心的是最佳DO值或临界值,不注意细胞代谢时的耗氧率。显而易见,用在以活细胞代谢为主体的发酵过程就有很大的局限性,应该重视细胞代谢流的存在。随着过程传感技术和计算机技术的发展,国家生化工程技术研究中心(上海)设计了一种用于生物过程多尺度研究的新概念发酵装置(已由上海国强生化工程装备有限公司组织生产,定型为FUS-50L(A)),该装置以生物反应器中物料流检测的观点,具有十四个以上在线参数检测或控制,并集中力量开发了一个适应多种反应器特点,融合多种过程理论和控制理论,便于发酵过程工艺分析和优化操作的软件包。在鸟苷发酵过程中,从反应器测量参数上发现了细胞代谢流迁移,由此实现了过程优化[]。该产品先后成功地在青霉素、红霉素、饲料金霉素、链霉素、黄霉素、泰乐霉素、棒酸、鸟苷、肌苷、基因工程白蛋白、基因工程疟疾疫苗、基因工程植酸酶、胰岛素原(PIP)、基因工程必特螺旋霉素等多种产品上发酵优化应用取得了大幅提高发酵单位能力,其优化结果一般可由几十升发酵罐直接放大到上百立方的工业生产发酵罐。
2、动物细胞大规模培养生物反应器
研制由于细菌等原核细胞表达系统在转录及修饰方面的缺陷,许多重要价值的蛋白质,特别是基因工程药物、疫苗、抗体等糖基化的需要,使哺乳类动物细胞表达系统成了一个更合适的工具,因此,哺乳类动物细胞表达系统引起了大家重视。以哺乳动物大规模培养技术为基础的生物制药产业在美国等西方国家得到了迅速发展,数十种产品已进入市场,取得了巨大的经济和社会效益。国外用于生产的动物细胞生物反应器已趋于大型化(最大到吨级规模)、多参数与高度自动化的计算机控制系统、以及适应动物细胞对大型环境因子高敏感性的反应器精巧设计制造,并形成商品化供应用户。中国自“七五”至“八五”攻关期间立题开展有关动物细胞生物反应器研究,取得了较大进展,但哺乳类细胞培养技术要求高,技术壁垒大,有关公司在未能掌握核心技术的情况下,单凭模拟很难开展工作。抗体等其他细胞表达产品,装药量大,中国科研单位已经掌握的早期生物药开发技术很难应用到新型药物生产工艺上,需要重新摸索;由于细胞株等上游配套技术的落后、反应器研制技术的差距、以及有关缺乏生化工程的研究等原因,因而缺乏必要的条件去掌握高表达细胞株构建和大规模细胞培养技术,难以突破技术瓶颈,中国有关动物细胞生物反应器产业仍近乎空白。
3、带pH测量与补料控制的摇床──摇床应用技术的发展
20世纪三十年代摇床问世以来,摇床就作为生物反应过程中必备的一种专用设备,用于微生物、动植物细胞菌种筛选、种子扩大培养等。由于摇床设备的特点,不能实时测量培养过程中的有关参数以及过程补料控制,因此长期以来一直以摇床的放瓶结果作为实验数据。当用来作为诸如菌种生理特性变化、培养基成分的作用以及温度、pH等环境条件变化等研究的依据时,实际上是一种缺乏过程研究的静态分析方法。这种方法的局限性是很显然的,例如以这种方法作为菌种选育后技术时,传统摇瓶筛选方法往往缺乏补料或供氧不足,并不一定处于代谢流分配最合理的状态,由此将出现严重的高产菌株漏筛现象。因此,国内外有关公司己注意开发带pH测量的摇床,并形成产品。
4、生物反应器中试系统设计
对于生产量大的传统生物技术产品,为了对已经通过前期研究(实验室研究和市场分析)的产品进行过程优化研究,在中试规模上达到高生产水平或质量,并进而为车间生产提供工艺放大依据和设备设计依据,必要时还可进行小批量生产,提供应用试验样品、或供市场销售的部分产品。为此,近年来许多有关发酵产品生产的企业迫切需要建立一个多功能的中试发酵车间。
5、大型生物反应器设计与制造技术研究
几十年来随着发酵工业的快速发展,发酵工程趋向设备大型化、高效和自动化。以传统生物技术产品来说,一些氨基酸、抗生素或发酵轻化工产品都在几十到几百M3以上发展,一些原来是小规模发酵罐的老厂搬迁新厂区,发酵罐的规模也普遍要求放大。基因工程产品一般附加值高,不需要大型生物反应器,但近年来随着基因工程酶生产技术的发展,如基因工程植酸酶的研究成功,又由于饲料添加剂的需求量大,用于基因工程高密度高表达的大型生物反应器研制已势在必行。特别是今后随着矿物质能源的耗竭,利用生物质生产燃料乙醇等已提到重要战略议事日程,高效节能的大型发酵装置的应用是降低生产成本的不可缺少的关键技术,如美国、巴西等国家已达2000M3以上发酵装置。

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