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如何利用流式细胞仪检测细胞周期
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第1个回答 2015-12-21
我以前在百度知道做过详细回答
http://zhidao.baidu.com/question/1496425628203796979.html?fr=iks&word=%CF%B8%B0%FB%D6%DC%C6%DA+%C1%F7%CA%BD&ie=gbk
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观察
细胞周期
样品
怎样
准备
答:
根据你所购买的试剂盒而定,
一般是先用70%乙醇先固定,然后加RNA酶和PI,半个小时左右上机检测就可以了.需要注意的就是加酒精固定的时候要用四度预冷的酒精
,缓慢的加,边加边晃动细胞,避免细胞黏连在一起.(1)细胞培养 取对数生长期的细胞,按1X106个/mL以1mL体积接种于6孔板内。培养24h后,加入...
细胞周期检测
方法即PI法的操作步骤
答:
3. 细胞染色:1500rpm离心5min,弃上清,以3mL的PBS洗涤一次,加入400uL溴化乙锭(PI,50ug/mL),100ul RNase A(100ug/mL ),4℃避光孵育30min。4. 流式分析: 以标准程序用
流式细胞仪检测
,一般计数2~3万个细胞,结果用
细胞周期
拟和软件ModFit分析。细胞周期是指能持续分裂的真核细胞从一次...
流式细胞仪测定细胞周期
各时相的原理和基本步骤(不用说具体使用的量...
答:
在细胞培养液中加入模拟核苷酸EdU (比较老的方法也可以用BrdU)。培养一小时 后,更换为正常的培养液继续培养
。模拟核苷酸可以像天然核苷酸一样被细胞摄取并整合入新合成的DNA。培养一段时间后(一般小于一个细胞周期),固定细胞。根据所使用模拟核苷酸的不同,使用不同的方法。EdU,改变缓冲液的pH值,...
流式细胞仪测细胞周期
图
怎样
分析
答:
-20℃固定保存。(3) 细胞染色 离心收集细胞(800rpm/min),以1mL的PBS洗细胞一次,加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭(PI),100ug/mL RNase A, 4℃避光孵育20分钟。(4)检测 以标准程序用
流式细胞仪检测
,汞激发波长488nm,计数8千个细胞,结果用软件WinMDI Version 2.9分析。
请教
流式细胞
术PI染色进行
细胞周期
分析的原理
答:
得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。细胞内的DNA含量随
细胞周期
进程发生周期性变化,如G0/G1期的DNA含量为2C,而G2期的DNA含量是4C。
利用
PI标记的方法,通过
流式细胞仪
对细胞内DNA的相对含量进行
测定
,可分析细胞周期各时相的百分比。
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