第1个回答 2012-06-16
初搞色谱总会纠结在这个极性的问题上，事实上，对于是液相色谱分离来说，影响因素太多，远不只是一个极性问题的，虽然至今世界上也没有通用的理论来准确说明分离机理，但有两点因素是最影响分离的，第一个是物质与流动相的极性，第二个叫洗脱能力，这两点都很重要。
了解这两点，你上面的问题就解决了。虽然说极性与洗脱能力是相关的，但用洗脱能力来理解出峰快与慢以及分离效果，用极性来理解出峰顺序，这样就容易理解了。反相色谱一般使用强度因子来表示，一般极性参数大的，强度因子就小，但甲醇与乙腈比较特殊，极性参数甲醇与乙腈分别为5.1与5.8，强度因子却是甲醇3.0，乙腈3.2。所以说象你上面问的“如果流动相极性偏大，是不是分离效果不好？还有就是如果分离度不好，加大水的比例，延长保留时间，会不会影响到分离效果？”可以这样理解，流动相洗脱能力越强分离越不好。而对于反相色谱来说，只有两相，一相是有机相，而另一相是水相。有机相是强洗脱剂，水是弱洗脱剂。当然有机相中的洗脱能力也是有差别的，按THF，ACN，MEOH顺序。而不要用极性去理解，那样太复杂了。
有机相比例越大，洗脱能力越强，水相比例越大，洗脱能力越弱，但越容易分离。
看下表：
甲醇/水 乙腈/水 四氢呋喃/水
10 相当于 6 相当于 4
20 12 10
30 22 17
40 32 23
50 40 30
60 50 37
70 60 45
80 73 53
90 86 63
100 100 72