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基因组DNA制备过程中提取缓冲液有哪些成分,作用是什么?
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推荐答案 2011-05-03
主要成分是:NaCl,Tris-HCl(PH=8),EDTA(PH=8),SDS。NaCl,Tris-HCl主要是调节溶液的PH,维持一定的离子浓度。EDTA主要是二价金属离子的
螯合剂
,使影响DNA的DNA酶中的
钙离子
和镁离子和EDTA结合,使酶失去活性,有利于提取完整DNA;SDS主要是和蛋白质结合,使其变形沉淀,从而利于DNA的提取,减少和清除带白质杂质!
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第1个回答 2011-05-03
STE:破坏细胞膜、核膜,分散好的真核生物组织、细胞在
含SDS和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质
SDS:可使组织蛋白与DNA分子分离
EDTA:能抑制细胞中DNase的活性,使DNA分子完整地以可
溶形式存在于溶液中
酚:抽提除去蛋白质
氯仿:除去DNA溶液中微量酚的污染
异戊醇:可减少蛋白质变性操作过程中产生气泡
乙醇:DNA可经乙醇沉淀
Rnase:除去RNA,进一步纯化DNA,获得高纯度DNA
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