最简单的羊肚菌菌种制作方法

Question

如题所述

Answer 1

羊肚菌是一种名贵食(药)用菌，目己开始仿生驯化栽培。羊肚菌母种的生产制作是仿生驯化栽培的第一步，也是关键的环节。目前羊肚菌母种一般以PDA培养基为母种培养基，这种母种培养基的菌丝在试管或培养皿上表现出菌丝纤细、扭结力不强等特点，用这种母种培养基制作的原种或栽培种菌丝也较纤细并且不易形成菌核，造成产量比较低。
因此，研究一种母种健壮、扭结力强并能在原种或栽培种上形成菌核的优质母种制作方法对羊肚菌的提高产量有重大促进作用。
本发明目的是解决上述现有羊肚菌毋种制方法存在的问题，提供一种菌丝健壮、扭结力强和在原种或栽培种七容易形成菌核的羊肚菌母种制作方法。
本发明是这样实现的:
1、按质量比将1~3份的新鲜无虫蛀圆叶杨碎枝条或圆叶杨树叶放入10份的水
中煮沸25~30min，过滤取汁制得圆叶杨浸出液。
2、圆叶杨浸出液和PDA培养液按质量比1:1混合后，按混合液的质量百分比再
加入Na3P04·12H200.2 % , KH2P040.2 % , MgSO4O.05 % , VB1O. 0059/o,搅拌均匀后在121士1℃下灭菌30min，制成培养基。
3、培养基冷却后接羊肚菌母种，把接好种的培养基在23 0C恒温下培养10~12d
后，再放入8~12℃的培养箱中培养4-6d，羊肚菌母种即制作完成。
本发明既能使羊肚菌母种培养基上表现出菌丝生长前段整齐、菌落呈圆形、放射状蔓延，双核菌丝多、扭结力强的特点，又同样在原种或栽培种上继续这些特点并且能比普通羊肚菌菌种多形成30%的菌核，因而在产最上比现有羊肚菌菌种种植所得的产量提高15%，从而对羊肚菌的驯化栽培有明显的促进作用。
下而结合实施例进一步说明木发明的具体内容。
具体实施方式实施例：
1、选用200g新鲜无虫蛀圆叶杨枝条剪成1~2cm小段或粉碎100g原叶杨干树叶，
加入1L水中煮沸25~30min，过滤取汁制得网n十杨浸出液。
2、圆叶杨浸出液和PDA培养液按质量比1:1混合后，按混合液的质量百分比再
加入Na3P04·12H200. 2%, KH2PO4O.2%, MgSO4O. 05%, VB1O. 005%搅拌均匀后在12±1℃下灭菌30min，制成培养基。
3、培养基冷却后接羊肚菌母种，把接好种的培养基在23℃恒温下培养11d后，再放入10℃的培养箱中培养5d，羊肚菌母种即制作完成。

Answer 2

母种的制作

一、培养基配方

1、黄豆芽500克(煮汁)，白糖20克，琼脂20克，羊肚菌基脚约50克，水1升。2、黄豆芽500克(煮汁)，白糖20克，琼脂20克，水1升。

3、栎木屑500克(煮汁)，白糖20克，琼脂20克，水1升。

4、马铃薯200克(煮汁)，白糖20克，琼脂20克，蛋白胨0.5克，牛肉膏0.5克，水1升。

5、蛋白胨1克，葡萄糖20克，琼脂20克，酵母膏1克，磷酸二氢钾1克，硫酸镁1克，维生素B1，1克; 水1升。PH值自然。

上述配方任选一组。将木屑或豆芽加水1升煮30分钟，过滤取汁，并将余下的水补足1升，加入其它原料，煮至溶化后，按母种制作常规方法，分装于18毫米X 180毫米或20毫米X 200毫米试管的1,'5,塞上棉塞，使用高压灭菌锅彻底灭菌; 在0.68千克压力下维持60分钟，自然冷却至指针回到原位才可打开，放成斜面备用。

二、菌种分离

首先要具有食用菌专业基础知识、多年的菌种分离经验及菌丝鉴别能力，其次要购置母种培养基、无菌接种箱、恒温培养箱、冰箱、高倍显微镜等必要设备。根据当地羊肚菌生长季节，趁羊肚菌生长旺盛时做菌种分离工作。

1、分离方法

羊肚菌的分离方法与其它食用菌大不相同。它需要一种助生菌与羊肚菌菌丝共生时才能出菇。这种助生菌长期活动在土壤中，有时以芽孢菌形式出现，有时以菌丝形式出现。它为羊肚菌的原基形成和子实体生长发育起着至关重要的作用。因此，从土壤中分离该菌比其它任何方式分离要好些。但从土壤分离难度太大，成功率不到万分之一，并且难以分辨，所以只有采取羊肚菌基脚士分离，才能真正找到羊肚菌的出菇菌丝。初学者可在四川绵阳市食用菌研究所购买培养好的羊肚菌优良母种，并参加现场培训。

2、操作过程

在羊肚菌生长的周围，可见白色菌丝充满土壤。从土壤中挑选这种菌丝容易成功。现介绍两种土壤分离的简易方法:一种是土壤直接分离，另一种是浸提分离。土壤直接分离法: 在羊肚菌生长的地方去掉羊肚菌，取周围5厘米以内的土壤，去掉表层，把土壤放入无菌接种箱内，然后放入试管培养基，进行接种箱空间消毒。即按接种箱每立方米空间用甲醛10毫升，高锰酸钾5克，混合产生气体消毒，半小时后才可操作。将基脚士用接种针挑取黄豆大小一块，迅速放到试管内的空白培养基上，每管放一块，塞上棉塞，接种后取出培养。浸提分离法: 将基脚土用无菌水稀释，澄清后用接种针蘸取少量溶液，滴到试管内的空白培养基上，塞上棉塞后取出培养。

分离后，放在12~18C温度下培养观察。3天后培养基上萌发菌丝，每天仔细检查每支试管的发菌及变化情况。区分和认识各类杂菌是最关键的核心技术。真正的羊肚菌菌丝最初为灰白色，生长很快，时间长会变成棕黄色，有时会出现菌核，母种7天长满试管，原种、栽培种15天可长满瓶底。是否分离成功，必须做栽培出菇试验，待出菇后才能准确认定是否是羊肚菌的菌种。一旦菌种分离成功，在以后的转接过程中要小心，不能再让杂菌感染，必须把好高温灭菌关和接种消毒关，才能保证菌种质量和成活率。