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求助跑qpcr
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求助QPCR
扩增效率的影响因素
答：
1、模板浓度过高会抑制PCR反应，可能会导致扩增效率降低。但同时可能会出现非特异性扩增导致结果的Ct值不可信，最终导致扩增效率不可信。2、在一定范围内提高退火温度不会太影响扩增效率。
小白
求助qpcr
产物直接测序是不好测吗
答：
PCR在扩增的过程中可能会出现突变的情况，测序结果中就可能会出现套峰之类的情况，而克隆之后测序理论上每个单克隆里面只会出现一种PCR产物的插入片段，可以挑选不同的克隆进行测序，直到找到自己想要的那个。质粒和PCR产物需要拿...
求助qPCR
扩增效率高的原因
答：
镁离子浓度低；buffer没有优化好 非特异性扩增较多
qPCR
溶解曲线程序运行多久
答：
一个小时。1、对于
qPCR
由于需要跑溶解曲线，qPCR溶解曲线程序运行，该程序大概需要一个小时，所以要加一小时时间。2、具体时间多长还要看仪器温度的升降速度，进口仪器升降速度较快，所以时间也会短一些。
qpcr
数据分析及作图方法
答：
qPCR
数据处理方法为△△Ct法原理 【△△Ct法原理】其特点是只依靠Ct值来计算结果，因此跑完qPCR之后的结果中除了Ct值外，其他数据几乎在后续分析和计算中是用不到的。但前提是目的基因和内参基因的扩增效率应基本一致。1、...
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