第1个回答 2019-07-14
DNA聚合酶的作用是催化DNA的复制,即将原料脱氧核糖核苷酸
通过引物与模板链进行配对,合成新的DNA单链.
DNA连接酶则是将两段分开的DNA链通过特定末端连接在一起.
DNA聚合酶
DNA聚合酶(DNA
polymerase)是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶
,
以DNA为复制模板,从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性。
定义
真核细胞有5种DNA聚合酶,分别为DNA聚合酶α(定位于胞核,参与复制引发,不具有5'-3'外切酶活性及3'-5'外切酶活性,有5'-3'聚合酶活性),β(定位于核内,参与低保真度复制,不具有5'-3'外切酶活性,其中疑似存在5'-3'聚合活性,不具3'-5'外切酶活性),γ(定位于线粒体,参与线粒体复制,均具有5'-3'外切酶活性、5'-3'聚合活性及3'-5'外切酶活性),δ(定位核,参与延长子链及错配修复,均具有5'-3'外切酶活性、5'-3'聚合活性及3'-5'外切酶活性),ε(定位于核,参与损伤修复,均具有5'-3'外切酶活性、5'-3'聚合活性及3'-5'外切酶活性)。
原核细胞:在大肠杆菌中,到目前为止已发现有5种DNA聚合酶,分别为DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ,都与DNA链的延长有关。DNA聚合酶I是单链多肽,可催化单链或双链DNA
的延长,于1956年发现;DNA聚合酶II则与低分子脱氧核苷酸链的延长有关;DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多,是促进DNA链延长的主要酶。DNA聚合酶Ⅳ和Ⅴ直到1999年才被发现。
DNA连接酶(DNA
Ligase)也称DNA黏合酶,在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色,那就是连接DNA链3‘-OH末端和,另一DNA链的5’-P末端,使二者生成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。
定义
DNA连接酶也称DNA黏合酶,在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色,那就是把两条DNA黏合成一条。无论是双股或是单股DNA的黏合,DNA黏合酶都可以借由形成磷酸双脂键将DNA在3'端的尾端与5'端的前端连在一起。虽然在细胞内也有其他的蛋白质,例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA为模版的情况下,将另一边的DNA单股断裂端,通过聚合反应的过程形成磷酸双脂键(phosphodiester
bond)来黏合DNA(DNA连接酶将DNA片段缝合起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸双脂键)。但是DNA聚合酶的黏合过程却只是聚合反应一个附带的功能而已,真正在细胞内扮演DNA黏合反应的工作还是以DNA黏合酶为主。DNA黏合酶的功能便是黏合断裂的DNA,而细胞内只有DNA复制与DNA修复的反应牵涉到DNA断裂的合成,因此DNA黏合酶就是在上述的两个机制扮演重要的角色。除了细胞内的黏合反应,随着分子生物学的进展,几乎大多数的分子生物实验室都会利用DNA黏合酶来进行重组DNA的实验,或许这也可以被规类为其另一种重要的功能。