western免疫印记反应原理

Question

如题所述

Answer 1

Western Blot，一种免疫检测技术，与Southern或Northern杂交方法相似，但其独特之处在于使用聚丙烯酰胺凝胶电泳来分离蛋白质。在这个过程中，目标检测物是蛋白质，而"探针"则是特异性的抗体，通过标记的第二抗体进行"显色"反应。首先，经过PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）分离的蛋白质样本会被转移到固相载体上，如硝酸纤维素薄膜。这种转移方式是非共价的，可以保持蛋白质的电泳分离状态和生物学活性。

固相载体上的蛋白质或多肽被用作抗原，它们会与相应的抗体发生免疫反应。接着，这个反应进一步与标记的第二抗体结合，这一步通常涉及到酶或同位素的标记。检测结果通过底物显色或放射自显影技术来实现，从而可以精确地检测出特异性目的基因在样本中表达的蛋白成分。总的来说，Western Blot技术广泛应用于蛋白水平表达的定量分析，是生物学研究中不可或缺的工具。