对被产物污染的pcr试剂盒有办法抢救吗

Question

如题所述

Answer 1

对被产物污染的pcr试剂盒有办法抢救
不是的，PCR纯化试剂盒—是直接水溶解的PAC产物就可以回收，回收效率高，但是只适合单一条带需要纯化测序的时候使用。
PCR凝胶试剂盒—是在PCR产物是混合物，有多条杂带的情况下，先跑胶将杂带分离，然后在将你所要的条带位置的胶切下回收，后者的回收效率低，但是很纯净。
首先，采用的是质粒模板；
其次，扩增得到的非单一条带，如果不纯化直接酶切，那么得到的将是带有相应酶切位点的几种片段，继续试验的话，菌落PCR鉴定时可能会出现几种不同大小的条带。
第三、PCR产物里面缓冲液并不是合适的酶切缓冲液，会极大的影响酶切的效率。甚至于根本就切不开，即便是隔夜酶切也不可以。