短芽孢杆菌涂不出单菌落是怎么回事？？

Question

菌液稀释涂板，OD值0.5左右稀释-3次到-7，没有单菌落，涂了几波了，只有一次-5次方的有126个但是-6次方一个都没有，其他的都是不规则长或者成片长，要么就不长，对了，怎么回事啊？？等着平板计数呢，好几次都不成功。求解，给点意见或者建议吧。PS：划线法活化有时候可以划出单菌落，有时候不行。到底可能是什么原因？

Answer 1

这说明稀释倍数不足，或者稀释方法存在问题，像你描述的-5次方的有126个但是-6次方一个都没有，这种情况几乎是不可能的，因此还是主要怀疑操作方法的问题。
至于划线接种画不出单个菌落，那就更加是操作的问题了，用接种环挑取少许菌苔，尽管肉眼看上去相当少，但实际上已经挑了几万个细菌，必须在分区划线时烧灼接种环以减少接种环上的细菌数量，这样才能分离出单个菌落。